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如何使用奧林巴斯顯微鏡CX43暗場功能

2025-4-24  閱讀(41)

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奧林巴斯顯微鏡CX43具備暗場觀察功能,適用于觀察透明或低對比度的樣品,如活細(xì)胞、微生物、細(xì)胞膜等。暗場顯微鏡通過特殊的光學(xué)配置,在樣品上投射斜向光線,使樣品在散射光下顯示出高對比度的圖像,而背景則保持黑暗。這種功能可以讓觀察者看到那些在常規(guī)明場條件下無法清晰觀察的細(xì)微結(jié)構(gòu)。以下是如何使用奧林巴斯CX43顯微鏡的暗場功能的步驟:

一、準(zhǔn)備工作

  1. 確保設(shè)備穩(wěn)定

    • 將顯微鏡放置在一個穩(wěn)定的工作臺上,確保在觀察過程中不會有震動影響。

  2. 清潔樣品和顯微鏡

    • 使用清潔的玻璃載片和蓋玻片準(zhǔn)備樣品,避免污漬或灰塵影響圖像質(zhì)量。

    • 清潔顯微鏡的物鏡、目鏡以及鏡頭等部件,確保無塵污漬,以避免影響觀察效果。

二、暗場觀察模式的設(shè)置

  1. 選擇適當(dāng)?shù)奈镧R

    • 暗場觀察通常使用較低倍率的物鏡(如10x或20x),以便獲得足夠的視野和亮度。

    • 需要注意,CX43顯微鏡支持不同倍率的物鏡,可以根據(jù)觀察的樣品選擇合適的物鏡。

  2. 安裝暗場聚光鏡

    • 奧林巴斯CX43顯微鏡需要使用專門的暗場聚光鏡。通常,CX43配有與暗場觀察兼容的聚光鏡,在安裝時(shí),需要確保將暗場聚光鏡正確安裝到聚光鏡座上。聚光鏡通常具有不同的數(shù)值孔徑(NA),選擇合適的數(shù)值孔徑有助于提高圖像質(zhì)量。

    • 聚光鏡數(shù)值孔徑選擇:在暗場模式下,一般選擇數(shù)值孔徑較大的聚光鏡(如NA 0.9或1.4),這有助于提高圖像的亮度和對比度。

  3. 調(diào)整光源和亮度

    • 啟動顯微鏡的光源,調(diào)節(jié)亮度至合適的水平。在暗場觀察中,光源的亮度需要調(diào)節(jié)得比較高,但又不能過于刺眼,以避免過度曝光或圖像質(zhì)量過差。

    • 奧林巴斯CX43顯微鏡的LED光源亮度可以調(diào)節(jié),根據(jù)樣品的不同,適當(dāng)增加或減少亮度。

三、調(diào)整光學(xué)系統(tǒng)

  1. 調(diào)節(jié)光闌(Aperture Diaphragm)

    • 暗場顯微鏡利用光源的斜射光進(jìn)行成像,因此調(diào)節(jié)光闌至適當(dāng)?shù)拇笮∈欠浅V匾摹U{(diào)節(jié)光闌時(shí),需要確保聚光鏡光斑的光線幾乎不直接照射到樣品上,只有散射光能通過樣品來形成圖像。

    • 在顯微鏡的觀察過程中,通過逐步調(diào)節(jié)光闌,可以獲得較為理想的圖像效果。

  2. 調(diào)整樣品位置和焦距

    • 用粗調(diào)焦旋鈕將樣品移到大致的焦距范圍內(nèi)。暗場觀察中,通常需要通過較細(xì)致的微調(diào)調(diào)節(jié)焦距,以確保樣品的細(xì)節(jié)清晰可見。

    • 調(diào)節(jié)焦距時(shí),確保圖像中心清晰,并且背景保持黑暗。

  3. 使用適當(dāng)?shù)臑V光片(如有需要)

    • 如果需要提高對比度或進(jìn)行特定的樣品觀察,可以使用適合的濾光片。根據(jù)需要選擇合適的濾鏡,以增強(qiáng)或抑制特定波長的光。

四、觀察樣品

  1. 細(xì)致調(diào)整焦距

    • 通過微調(diào)焦距,使樣品的細(xì)節(jié)清晰顯示。如果樣品處于運(yùn)動狀態(tài),注意觀察過程中樣品的變動情況。

  2. 觀察圖像

    • 在暗場模式下,背景應(yīng)保持黑暗,而樣品的細(xì)微結(jié)構(gòu)則應(yīng)顯示為明亮的光點(diǎn)或細(xì)線條。這種效果是通過樣品的散射光所產(chǎn)生的。

    • 在不同倍率下,觀察細(xì)胞、微生物或其他樣品的細(xì)節(jié)。暗場觀察使得透明、無色的結(jié)構(gòu)如細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞膜等能夠在黑色背景下清晰可見。

  3. 調(diào)節(jié)對比度和亮度

    • 如果圖像亮度過高或?qū)Ρ榷炔粔颍梢赃m當(dāng)調(diào)整光源亮度或光闌大小。

    • 如果圖像過于模糊或不清晰,可以進(jìn)一步微調(diào)焦距或物鏡位置。

五、圖像記錄與分析

  1. 拍照與記錄

    • 如果需要記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可以使用顯微鏡的攝影系統(tǒng),連接數(shù)字?jǐn)z像頭或相機(jī)進(jìn)行拍照。奧林巴斯CX43顯微鏡支持多種圖像采集設(shè)備,能夠幫助用戶保存樣品圖像。

    • 在拍照時(shí),確保樣品處于清晰焦距,背景依然保持黑暗,樣品細(xì)節(jié)明顯可見。

  2. 數(shù)據(jù)分析

    • 通過顯微鏡采集的圖像,可以使用相關(guān)圖像處理軟件進(jìn)行進(jìn)一步分析,研究樣品的形態(tài)、分布等信息。

六、結(jié)束使用

  1. 關(guān)閉光源與設(shè)備

    • 觀察完畢后,首先關(guān)閉顯微鏡的光源,然后關(guān)閉顯微鏡的電源。確保設(shè)備處于安全關(guān)閉狀態(tài),以延長設(shè)備壽命。

  2. 清潔設(shè)備

    • 使用暗場觀察模式時(shí),聚光鏡、物鏡等部分可能會有油漬或其他污染物,因此使用前后需要清潔設(shè)備。

    • 清潔物鏡和聚光鏡時(shí),使用專用的清潔紙或布,不要直接觸碰鏡頭表面。

小結(jié)

使用奧林巴斯顯微鏡CX43的暗場功能時(shí),核心要點(diǎn)是選擇適當(dāng)?shù)奈镧R和聚光鏡,合理調(diào)節(jié)光源亮度、光闌以及焦距,以確保圖像的高對比度和清晰度。暗場功能特別適用于觀察透明或低對比度樣品,能夠幫助研究人員深入了解細(xì)胞結(jié)構(gòu)、微生物活動等細(xì)節(jié)。通過適當(dāng)?shù)牟僮鳎梢垣@得高質(zhì)量的暗場圖像,推動相關(guān)科研工作的發(fā)展。



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