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供貨周期 | 現貨 | 規格 | 100ml / 500ml |
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貨號 | P2840 | 應用領域 | 環保,化工,生物產業,農林牧漁,制藥/生物制藥 |
主要用途 | 用于 SDS-PAGE 或非變性 PAGE 等蛋白電泳膠的常規染色 |
諾博萊德 IEF考馬斯亮藍染色液
IEF考馬斯亮藍染色液 凝膠染色
產品簡介:
考馬斯亮藍染色液(Commassie Blue Staining Solution)是以考馬斯亮藍 R250 為染料可用于 SDS-PAGE 或非變性 PAGE 等蛋白電泳膠的常規染色或 Western 轉膜后 PAGE 膠上殘余蛋白的檢測。
等點聚焦染色后考馬斯亮藍染色又稱 IEF 考馬斯亮藍染色,一般與三lv乙酸溶液及脫色液 聯合使用。本染色液經過改良,不含有毒的甲醇,但含有刺激性氣味的乙酸。
用途:IEF蛋白電泳膠的染色
自備材料:
1、20%三lv乙酸水溶液
2、水平或側擺搖床
3、蒸餾水
4、20%甘油水溶液
具體產品的參數以收到產品說明書的參數為準
操作步驟(僅供參考):
1、臨用前,取適量的考馬斯亮藍染色液和硫酸銅溶液,按 99:1 的比例混合,即為 IEF 考 馬斯亮藍染色液,即配即用。
2、等點聚焦電泳結束后,取凝膠放入 5-10 倍體積的 20%三lv乙酸水溶液,置于水平或側 擺搖床上緩慢搖動 30-60min。
3、傾去 20%三lv乙酸水溶液,加入 10 倍體積的 30%甲醇水溶液(含 10%醇),置于水 平或側擺搖床上緩慢搖動 15-20min。
4、傾去 30%甲醇水溶液(含 10%乙醇),加入新鮮配制的 IEF 考馬斯亮藍染色液,置于水 平或側擺搖床上緩慢搖動 20min 以上(膠厚度小于等于 1mm)或 1h 以上(膠厚度大于 1mm)。
5、傾去染色液,用蒸餾水沖洗。
6、加入適量常規脫色液,確保脫色液可以充分覆蓋凝膠;推薦常規脫色液的配方是:40%乙醇,10%乙酸,50%蒸餾水。
7、置于水平或側擺搖床上緩慢搖動,室溫脫色 4~24h,期間更換脫色液 2~4 次,直至藍 色背景基本上全部被脫去,并且蛋白條帶染色效果達到預期,通常蛋白條帶在脫色 1~2h 后即可出現。
8、完成脫色后把凝膠保存在水中,用于后續的拍照等。保存在水中的凝膠會發生溶漲。如 需避免溶漲,可以把膠保存在含 20%甘油水溶液中,長期保存可以制備干膠
注意事項:
1、染色時如果把凝膠和染色液一起放置在微波爐中適當加熱,可以大大加快染色速度。但 加熱時宜盡量避免沸騰,以免出現因暴沸而導致的凝膠碎裂。
2、脫色期間可以在脫色液中加入一片吸水紙,可以使部分染料吸附在吸水紙上,加快脫色; 脫色時間過長也會導致蛋白條帶的顏色變淺。
3、如果希望染色的背景更低,希望獲得更加清晰的蛋白條帶,可以加入適量的室溫蒸餾水 進行洗滌。通過蒸餾水洗滌可以進一步降低背景。在 4℃蒸餾水中浸泡過夜可以獲得背景更 低,條帶更清晰的條帶。在次日對 4℃蒸餾水浸泡過夜的已經進行了染色的凝膠再同前一天 一樣進行染色和洗滌可以進一步改善染色效果,獲得更好的考染蛋白條帶。
4、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
IEF考馬斯亮藍染色液 凝膠染色
產品訂購信息:
P2840 IEF考馬斯亮藍染色液 100ml / 500ml
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