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液相色譜儀使環境污染分析得到新的發展
隨著固定相的發展，有可能在充分保持生化物質活性的條件下完成其分離。液相色譜儀成為解決生化分析問題有前途的方法。由于HPLC具有高分辨率、高靈敏度、速度快、色譜柱可反復利用，流出組分易收集等優點，因而被廣泛應用到生物化學、食品分析、醫藥研究、環境分析、無機分析等各種領域。液相色譜儀與結構儀器的聯用是一個重要的發展方向。質譜連用技術受到普遍重視，如分析氨基甲酸酯農藥和多核芳烴等，液相色譜儀連用也發展很快，如在環境污染分析測定水中的烴類，海水中的不揮發烴類，使環境污染分析得到新的發展。
液相色譜儀系統由貯液器、泵、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。貯液器中的流動相被高壓泵打入系統，樣品溶液經進樣器進入流動相，被流動相載入色譜柱（固定相）內，由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數，在兩相中做相對運動時，經過反復多次的吸附-解吸的分配過程，各組分在移動速度上產生較大的差別，被分離成單個組分依次從柱內流出，通過檢測器時，樣品濃度被轉換成電信號傳送到記錄儀，數據以圖譜形式打印出來。
與試樣預處理技術相配合，所達到的高分辨率和高靈敏度，使分離和同時測定性質上十分相近的物質成為可能，能夠分離復雜相體中的微量成分。隨著固定相的發展，有可能在充分保持生化物質活性的條件下完成其分離。
液相色譜儀成為解決生化分析問題有前途的方法。由于HPLC具有高分辨率、高靈敏度、速度快、色譜柱可反復利用，流出組分易收集等優點，因而被廣泛應用到生物化學、食品分析、醫藥研究、環境分析、無機分析等各種領域。液相色譜儀與結構儀器的聯用是一個重要的發展方向。
1、*，液體對于氣體是有一定的溶解度的。液體的壓力越高，對氣體的溶解度越好。所以，當一瓶未開封靜置的可樂，你是看不到氣泡的，因為氣泡都溶解在里面了。當你開啟瓶蓋，直接的影響就是瓶子里面的壓力降低了，對氣體的溶解度變小，所以氣體就析出變成一個個的小氣泡。
2、喝過啤酒或者碳酸飲料的人都有這樣的經歷，當你搖晃瓶子，然后瞬間把瓶蓋開啟，啤酒或碳酸飲料瓶中會噴出大量泡沫，搖晃的越劇烈，噴射的越猛，不難看出，溶解氣體的液體在振蕩和運動過程中，也容易讓氣泡析出。
3、上學的時候，化學課上，我們曾經懷疑過一個問題：把一升甲醇倒進一生純水里面，液相色譜儀的體積是不是兩升？當我們親自試驗后，就排除了這個疑問，而且我們可以明顯看到，當兩種液體混合的時候，會有大量的氣泡冒出，體積也小于兩升。
進口液相色譜儀按其分離機理，可分為四種類型。
吸附色譜法的固定相為吸附劑，色譜的分離過程是在吸附劑表面進行的，不進入固定相的內部。與氣相色譜不同，流動相（即溶劑）分子也與吸附劑表面發生吸附作用。在吸附劑表面，樣品分子與流動相分子進行吸附競爭，因此流動相的選擇對分離效果有很大的影響，進口液相色譜儀一般可采用梯度淋洗法來提高色譜分離效率。
在聚合物的分析中，吸附色譜一般用來分離添加劑，如偶氮染料、抗氧化劑、表面活性劑等，也可用于石油烴類的組成分析。
分配色譜法
這種色譜的流動相和固定相都是液體，樣品分子在兩個液相之間很快達到平衡分配，利用各組分在兩相中分配系數的差異進行分離，類似于萃取過程。
一般常用的固定液有β（ODPN）、聚乙二醇（PEG400～4000）、*撐乙二醇（TMG）和角鯊烷（SQ）。采用與氣相色譜（GC）同樣的方法，將固定液涂漬在多孔的載體表面，但在使用中固定液易流失。目前，應用較多的是鍵合固定相。在這種固體相中，固定液不是涂在載體表面，而是通過化學反應在純硅膠顆粒表面鍵合上某種有機基團。
例如，利用氯代十八烷基硅烷與硅膠表面的羥基（-OH）之間的反應就可以形成一烷基化表面。這種固定液的優點是不易被流動相剝蝕。在分配色譜法中，流動相可為純溶劑，也可以采用混合溶劑進行梯度淋洗，其極性應與固定液差別大一些，以避免兩者之間相溶。
在我們做實驗的時候用液相色譜儀分析過程的時候影響溶液遷移的因素比較多。同一樣的組分在不同的色譜調件下保留的值也會不同，即使是在一樣的測定條件下。同一組分在不同的色譜柱上面保留的數值差別也會不同。所以，液相色譜和氣象色譜相對比，定性的難度大很多，液相色譜儀分析經常使用的定性方法有很多。比如，利用已知標準樣品定性，利用檢測器的選擇性定性或者利用紫外檢測器全波長掃描功能等來定性。
進口液相色譜儀的使用方法的具體步驟
1、色譜柱它包括空柱和填料。空柱是內壁拋光的不銹鋼管，內徑為4～5mm，長100～250mm。按氣相色譜法中洗滌空柱的方法洗凈，用勻漿法填充固定相。將此柱裝入儀器的管路中，用柱式機械往復泵輸入新鮮脫氣的流動相。等基線平直后可用苯、萘、菲的混合試液，用正己烷或甲醇：水為流動相測定柱效及分離度塔板數在2～3萬/ml以上及分離度在1.5以上者，柱效好。
為防止柱污染，常用1個 50mm長，4~5mm內徑，裝有硅膠或立柱相同填料的保護柱接在主柱之前，以延長色譜柱的壽命。反相鍵合相柱用畢。必須用水充分流經，以洗去鹽類、酸堿等雜質防止柱生銹及填料中雜質的積聚，再用甲醇流經洗滌使色譜柱獲得再生。
2、流動相的洗脫方式配好經脫氣的流動相放于貯液瓶中，經過有濾過頭、內徑2mm的聚四氟乙烯管流入高壓泵進入色譜柱，zui后自檢測器流出或收集或作廢液回收。用流動相洗脫的方式有恒溶劑脫洗法，即自洗脫開始到結束，溶劑的配比恒定。
另一類為梯度洗脫法，即使溶劑的極性強度在色譜過程中逐漸增加。須按一定程序不斷改變流動相的濃度配比，從而使同一個試樣中組分性質相差較小的及較大的都能在一次色譜過程中很好分離，而整個色譜過程縮短。必須注意，梯度洗脫法不能用于分子排阻色譜及用電化學檢測的反相液相色譜法中。
3、檢測器適用于血藥濃度的檢測器有紫外線吸收，熒光發射和電化學三種。紫外檢測器應用于對紫外光有吸收的藥物，大多數藥物分子對紫外光有吸收，故能較普遍采用，檢測限有0.1μg左右。液相色譜儀有固定波長型、可變波長型及掃描器，既能使流動相停流作組分的定性定量檢測，又能提高測定靈敏度，重現性較好。熒光發射檢測器對能產生熒光的藥物才能使用。