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天津市蘭博實驗儀器設備有限公司

制備型加壓液相色譜的分類有些哪些

時間:2019-4-16 閱讀:1067
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制備型加壓液相色譜,按照色譜柱和樣品量的大小,分為:(1)低壓液相色譜;(2)中壓液相色譜;(3)高壓液相色譜;(4)快速色譜。低壓、中壓與高壓液相色譜的壓力范圍之間會存在一定交疊,沒有統一、明確的標準。
 
1、快速色譜
柱壓通常為2bar(或30psi)左右,對于那些容易分離的簡單混合物,由于快速色譜具有操作簡便、經濟等優點,常常是實驗室的佳選。但快速色譜不同于一般的層析分離,這種分離沒有壓力,而快速分離通常使用瓶裝氮氣加壓,使流動相具有一定的流速,從而縮短了分離時間。
 
快速色譜使用的柱子一般是玻璃柱,柱直徑為3~10cm.長度為7~15cm。快速色譜中使用廣泛的固定相為硅膠。采用的粒徑通常為:25~40μm,40~63μm或63~200μm的球形固定相。其它如鍵合相、氧化鋁、聚酰胺吸附劑也常用作快速色譜的固定相使用。
 
2、低壓色譜(LPLC)
柱壓一般低于5bar(或75psi)。
 
低壓色譜一般是由蠕動泵、進樣閥和檢測器組成,可以連續化,實現自動的梯度淋洗和餾分收集等操作。色譜柱管一般是玻璃或聚合物材料的,長度一般為240-440mm,內徑為10-40mm。
 
對于大多數在紫外區有吸收的物質,光學檢測器很常用。填料一般使用軟質的葡聚糖、瓊脂糖、纖維素、合成高聚物或離子交換劑,粒徑一般為40-60μm。
 
3、中壓液相色譜(MPLC)
柱壓在5-20bar(或75-300psi)之間,廣泛用于實驗室和工業規模的生物制品(如動物臟器提取液、濃縮液、體液、植物提取液、生物技術發酵液等--往往需要經過濾膜作初級凈化)的處理,以提取或純化所需的產品。
 
4、高壓液相色譜(HPLC)
是指柱壓一般大于20bar(或300psi)的“高壓(或)液相色譜”,通常指所用色譜柱的塔板數大于2000,一般是在2,000~20,000的范圍之間。
 
當需要從大量的物質中分離純化不足1%的所需成分時,分離工作將會十分困難,往往在純化的后階段需要使用10μm或更小顆粒的填料。為獲得所需微量組分,可采用如下分離手段:制備型分離→半制備型分離→分析型分離→產物。為提高每次分離獲得純品的數量,制備型高壓液相色譜分離通常在超載情況下運行。
 
高壓液相色譜,即目前常用的液相色譜。色譜柱內填裝的是粒度范圍較窄的微小顆粒固定相(3~30μm),為使流動相流出,需采用較高的壓力,同時系統的復雜性及成本亦增大,但分辨率可得到較大的提高。而填裝較大顆粒的固定相時,如中壓液相色譜系統,裝柱較容易,柱的通透性較高(只需較低的泵壓力),可采用更大的色譜柱和更經濟的儀器,由此分辨率也較低。

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