敵菌靈是一種殺菌劑,常用于防治蔬菜灰霉病、、斑枯病、霜霉病、茭白胡麻葉斑病等,具有低毒、內吸性、殺菌譜廣等特點,廣泛應用于糧食蔬菜等農作物。
異菌脲是一種觸殺型殺菌劑,對葡萄孢屬、核盤菌屬、小核菌屬、鏈孢霉屬均具有較好抑菌活性,主要用于蔬菜灰霉病、番茄早疫病、蘋果斑點落葉病和輪紋病的防治。
我國在2014年發布的《食品安全國家標準 食品中農藥大殘留*》*中指出,黃瓜、番茄中敵菌靈的大殘留*值(MRL)均為10mg/kg,異菌脲的大殘留量(MRL)分別為2mg/kg和5kg/kg。
目前國內對于敵菌靈和異菌脲農藥殘留量的檢測主要有氣相色譜法、液相色譜法和氣質聯用法等,前處理方法主要有液液萃取、固相萃取和基質分散固相萃取等。
一、實驗儀器
液相色譜儀、氮吹儀、高速均質機、電子天平、離心機、粉碎機。
二、試劑
敵菌靈、異菌脲農藥標準品、甲醇、乙腈、丙酮、正己烷、氯化鈉
三、樣品預處理過程
1、 準確稱取粉碎均勻的試樣25g(至0.01g)于250ml廣口瓶中;
2、加入50.0ml乙腈,均質機高速均質2min,全部倒入100ml聚丙烯(PP)塑料離心管中;
3、4000rpm離心5min,取上清液倒入預先稱取5g-7g氯化鈉的100ml聚丙烯(PP)塑料離心管中,蓋上塞子,劇烈震蕩1min,靜置30min,使乙腈相和水相充分分層。
4、從離心管中吸取10.0ml乙腈溶液至15ml玻璃樣品管中,置于氮吹儀80℃水浴氮吹蒸發至近干;
5、加入2.0ml正己烷漩渦混勻待凈化。
6、依次用5.0ml正己烷+丙酮(90+10)淋洗液和5.0ml正己烷預淋洗小柱,當正己烷液面層到達柱吸附層表面時,立即移入待凈化樣液,棄去上樣流出液,用5.0ml正己烷+丙酮(90+10)淋洗液清洗樣品管后淋洗小柱,并重復一次,用15ml玻璃樣品管接收洗脫液。
7、將盛有洗脫液樣品管置于氮吹儀上,水浴50℃氮吹蒸發至干,加入2.0ml甲醇漩渦混勻,過0.22μm有機微孔濾膜,上液相色譜測定。
四、工藝流程
粉碎→均質→離心→提取有效成分→氮吹濃縮→漩渦混勻→固相萃取凈化→氮吹濃縮→漩渦混勻→過濾→上樣
五、色譜檢測
六、結論
建立了采用固相萃取—液相色譜法同時測定黃瓜、番茄中敵菌靈和異菌脲農藥殘留量的方法,并優化了實驗條件。
本實驗敵菌靈和異菌脲兩種農藥的添加回收率在82.5%-102.8%之間,RSD在2.95%-8.68%之間,精密度和準確度都較高,操作簡單快捷、方法準確可靠,使用本方法*可以滿足黃瓜、番茄中敵菌靈和異菌脲農藥殘留量的日常監測需求。
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