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一、實驗原理

NR/R雙向電泳的基本原理是根據LaemmLi的SDS電泳原理設計的，NR指的是非還原相，R指的是還原相。

SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳可將不同相對分子質量的蛋白質按相對分子質量大小分離開來。NR/R雙向對角線電泳的向是在非還原條件下的SDS電泳，電泳結束后將膠條切下，置于含 2-硫基乙醇的樣品處理液中處理，使其-S-S-鍵被還原斷裂，將處理后的膠條置于第二向SDS電泳槽的夾層中凝膠上方，然后進行第二向電泳。

電泳結果中凡是即無鏈內二硫鍵又無鏈間二硫鍵的蛋白質均處于對角線上，凡含有鏈間二硫鍵的蛋白質，因二硫鍵斷裂，使兩條或兩條以上的肽鏈分開，相對分子質量變小，遷移率加大，而出現在對角線的下方，凡含有鏈內二硫鍵的蛋白質，因二硫鍵斷裂，而使肽鏈松散，遷移率降低，而出現在對角線的上方。

二、實驗用品

  （一）器材

（1）垂直板型電泳裝置。

（2） 1ml 和100µL微量進樣器，10µL微量進樣器。

（二）試劑  

（1）向樣品處理用緩沖液：62.5mmol/L Tris.Hcl,2% SDS,10%甘氨酸，PH6.8。

（2）第二向樣品處理用緩沖液：62.5mmol/L Tris.Hcl,2% SDS,5%巰基乙醇，10%甘氨酸，PH6.8。     

（3）電泳緩沖液：同常規的SDS電泳，二向均相同。

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