久久无码人妻一区二区三区午夜_久久久久精品久久久久影院蜜桃_亚洲综合欧美色五月俺也去_交换娇妻呻吟声不停中文字幕

您好, 歡迎來到化工儀器網

| 注冊| 產品展廳| 收藏該商鋪

4008-010-685

Download

首頁   >>   資料下載   >>   細胞破碎的四種方法

北京來亨科學儀器有限公司

立即詢價

您提交后,專屬客服將第一時間為您服務

細胞破碎的四種方法

閱讀:1670      發布時間:2021-04-06
分享:

一、機械破碎法:是指利用搗碎機、研磨器或勻漿器 等將細胞破碎開來 。


1. 高速組織搗碎:將材料配成稀糊狀液,放置于筒內約1/3體積,蓋緊筒蓋,將調速器先撥至慢處,開動開關后,逐步加速至所需速度。此法適用于動物內臟組織、植物肉質種子等。


2. 玻璃勻漿器勻漿:先將剪碎的組織置于管中,再套入研桿來回研磨,上下移動,即可將細胞研碎,此法細胞破碎程度比高速組織搗碎機為高,適用于量少和動物臟器組織。


二、物理破碎法:指利用溫度差、壓力差或超聲波等將細胞破碎開來。


1.用一定功率的超聲波處理細胞懸液,使細胞急劇震蕩破裂(借助超聲的震動力破碎細胞壁和細胞器)。
機制:可能與強聲波作用溶液時,氣泡產生、長大和破碎的空化現象有關,空化現象引起的沖擊波和剪刀力使細胞裂解。
超聲波破碎的效率取決于聲頻、聲能、處理時間、細胞濃度和細胞類型等。(使用時注意降溫,防止過熱)。


2. 高壓破碎:細胞懸浮液從高壓室的環狀隙噴射到靜止的撞擊環上,被迫改變方向經出口管流出。此過程中細胞經歷了高速造成的剪切的碰撞及高壓到常壓的變化,從而破碎釋放內含物。
這是一種溫和的、*破碎細胞的較理想的方法。


3. 反復凍融法:將細胞在-20度以下冰凍,室溫融解,反復幾次,由于細胞內冰粒形成和剩余細胞液的鹽濃度增高引起溶脹,使細胞結構破碎。


三、化學破碎法:指利用甲醛、丙酮等有機溶劑或表面活性劑作用于細胞膜,使細胞膜的結構遭到破壞或透性發生改變 。


有些動物細胞,例如腫瘤細胞可采用十二烷基磺酸鈉(SDS)、去氧膽酸鈉等細胞膜破壞。濃度一般為1mg/ml。


四、酶學破碎法 :選用合適的酶,使細胞壁遭到破壞,進而在低滲溶液中將原生質體破碎開來。
細菌細胞壁較厚,可采用溶菌酶處理效果更好。
裂解液標準配方: :50mM Tris-HCl(pH8.5~9.0), 2mM EDTA, 100mM NaCl, 0.5% Triton X-100, 1mg/ml溶菌酶。(溶菌酶在這個pH范圍內比較好發揮作用) 。


綜合敘述:無論用哪一種方法破碎組織細胞,都會使細胞內蛋白質或核酸水解酶釋放到溶液中,使大分子生物降解,導致天然物質量的減少,加入二異丙基氟磷酸(DFP)可以抑制或減慢自溶作用;加入碘乙酸可以抑制那些活性中心需要有疏基的蛋白水解酶的活性,加入PMSF也能清除蛋白水解酶活力,但不是全部,而且應該在破碎的同時多加幾次;另外,還可通過選擇pH、溫度或離子強度等,使這些條件都要適合于目的物質的提取。

提供商

北京來亨科學儀器有限公司

下載次數

87次

資料大小

267KB

資料類型

JPG 圖片

資料圖片

--

瀏覽次數

1670次

產品展示

會員登錄

請輸入賬號

請輸入密碼

=

請輸驗證碼

收藏該商鋪

標簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個,單個標簽最多10個字符)

常用:

提示

您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復您~
在線留言
主站蜘蛛池模板: 蒲城县| 富蕴县| 罗田县| 正镶白旗| 兰西县| 陈巴尔虎旗| 逊克县| 拜城县| 东明县| 哈巴河县| 澄迈县| 泰和县| 盱眙县| 武川县| 桂林市| 定远县| 泉州市| 屏山县| 河间市| 报价| 嘉禾县| 于都县| 色达县| 石河子市| 资兴市| 化德县| 团风县| 阳新县| 逊克县| 安仁县| 泰安市| 外汇| 江源县| 普陀区| 宣城市| 金湖县| 定南县| 蛟河市| 磐石市| 化德县| 攀枝花市|