一文為大家介紹SEC色譜柱的分離機(jī)理
SEC色譜柱是利用多孔凝膠固定相的*性產(chǎn)生的一種,主要根據(jù)凝膠孔隙的孔徑大小與高分子樣品分子的線團(tuán)尺寸間的相對(duì)關(guān)系而對(duì)溶質(zhì)進(jìn)行分離的分析的方法。適用于對(duì)未知樣品的探索分離,它能很快提供樣品按分子大小組成的全面情況,并迅速判斷樣品是簡(jiǎn)單的還是復(fù)雜的混合合物,并提供樣品中各組分的近似分子量。
下面為大家介紹下SEC色譜柱的分離機(jī)理:
1、主要取決于凝膠的孔徑大小與被分離組分分子尺寸之間的關(guān)系,與流動(dòng)相的性質(zhì)沒有直接的關(guān)系。
2、樣品分子與固定相之間不存在相互作用,色譜固定相是多孔性凝膠,僅允許直徑小于孔徑的組分進(jìn)入,這些孔對(duì)于溶劑分子來說是相當(dāng)大的,以致溶劑分子可以自由的擴(kuò)散出入。樣品中的大分子不能進(jìn)入凝膠孔洞而*被排阻,只能沿多孔凝膠粒子之間的空隙通過色譜柱,首先從柱中被流動(dòng)相洗脫出來;中等大小的分子能進(jìn)入凝膠中一些適當(dāng)?shù)目锥粗校荒苓M(jìn)入更小的微孔,在柱中受到滯留,較慢地從色譜柱洗脫出來;小分子可進(jìn)入凝膠中絕大部分孔洞,在柱中受到更強(qiáng)的滯留,會(huì)更慢的被洗脫出;溶解樣品的溶劑分子,其分子量最小,可進(jìn)入凝膠的所有孔洞,最后從柱中流出,從而實(shí)現(xiàn)具有不同分子大小樣品的*分離。在分子排阻色譜法中,溶劑分子從柱中流出,這一點(diǎn)明顯不同于其他液相色譜法。
3、在SEC中,不同尺寸樣品分子的分布系數(shù)K總保持在0~1之間。K=0說明溶質(zhì)*被排除在填料孔外,稱為全排斥,即填料的排斥極限;K=1說明溶質(zhì)可*進(jìn)入填料孔內(nèi)。稱為全滲透,即填料的滲透極限。
4、對(duì)與某一大小分子其洗脫一體積等于流動(dòng)相體積與該尺寸溶質(zhì)可以滲透進(jìn)入空洞內(nèi)部的那部分體積的總和
希望上述內(nèi)容能夠幫助大家更好的了解本產(chǎn)品。
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