解凍步驟
從液氮罐取出凍存的細(xì)胞后立即置于37℃水浴搖晃Cryo.sTM凍存管1-2分鐘。解凍過程需要越快越好。
轉(zhuǎn)移解凍的細(xì)胞于15 mL離心管,立即用大量的含有血清的細(xì)胞培養(yǎng)基混勻。
500 x g離心細(xì)胞5 分鐘,去除上清液,用適量的含有血清的細(xì)胞培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞,然后轉(zhuǎn)移到細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
按照建議的細(xì)胞濃度接種。
接下來的12小時細(xì)胞進(jìn)入靜默期。
間隔24小時和48小時更換培養(yǎng)基
如果細(xì)胞感染了病毒,也可以參考以上步驟進(jìn)行冷凍存儲和解凍的操作。
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