胎牛血清（FBS）的基礎知識與提取方法！

一、什么是胎牛血清（FBS）？

胎牛血清（FBS）是指通過封閉的采集系統從牛胎兒的血液中提取的血清。血清又是什么呢？血清是血液自然凝結后剩下的琥珀色血液部分；通常通過離心進一步精制，以去除殘留的血細胞。不含血細胞、纖維蛋白及凝集因子等，含有多種對細胞生長必需的營養因子及大分子物質。

二、胎牛血清可以用在哪里？

胎牛血清（FBS）用作真核細胞體外細胞培養的生長補充劑 。動物血清（牛血清和其它動物血清）都用于細胞培養，其中使用泛的是胎牛血清（FBS）。 FBS含有生長因子和極低水平的抗體，因此在許多不同的細胞培養應用中具有多功能性。在FBS中發現了1000多種成分，包括蛋白質，電解質，脂質，碳水化合物，激素，酶和其他不確定的成分，這些成分在許多培養條件下對于支持細胞生長都是必需的。

制造環境中的學術和工業研究人員以及科學家都在其細胞培養基中使用胎牛血清（FBS）進行調查，包括生物技術研究/生產，疫苗制造，克隆和動物診斷。

胎牛血清能夠用在人獸疫苗及生物技術藥物的科研、工業生產和質量控制領域。胎牛血清通常用于人源細胞系和原代細胞培養。

三、胎牛血清的優點是什么？

與其它類型血清相比，胚胎期動物血清含有更多的生長因子，及較少的gamma球蛋白含量。此外，跟新生動物血清和成體動物血清相比，胚胎期血清含有更低濃度的補體。補體具有溶解細胞的副作用，還會干擾免疫檢測。

四、胎牛血清的來源地是哪里？

胎牛血清的主要來源地就是那些大量養牛的國家，包括美國、澳大利亞、新西蘭、加拿大及南美和中美洲地區，由政府機構管理血清制品的生產及收集過程。 胎牛血清分為美國（USDA）級和歐盟級。其中，美國級胎牛血清沒有瘋牛病（BSE）及口蹄疫（FMD）污染，能夠出口到任何國家，而歐盟級胎牛血清只在大部分歐洲國家及亞洲國家銷售。

五、如何保存胎牛血清？

胎牛血清一般是在-5°到-20°之間凍存，2°到8°之間融化。一個比較好的辦法是，將胎牛血清分裝到50ml管中，這樣做就避免了反復凍融對血清造成的危害。偶爾一些試管等分的血清在冷凍溫度下保持液態。 這是由于缺少成核中心，就是一些引發結晶（冷凍）的顆粒物質。只需用手指輕彈管子，它們就會立即固化。 血清融化后常出現沉淀，可能是血清蛋白變性造成的。簡短離心即可除去沉淀，并且，這些沉淀一般不會影響血清質量的。

六、胎牛血清的提取方法和流程

胎牛血清應取自剖腹產的胎牛，胎牛血清是高的，因為胎牛還未接觸外界，血清中所含的抗體、補體等對細胞有害的成分最少。現有的胎牛血清制備工藝復雜、成本高，且純度低，不利于體外細胞培養。

1)將懷孕9個月的母牛進行剖腹產，產前采用側臥，剖腹產前進行局部麻醉；

2)手術切口位置選擇在左腋窩腹壁的五分之二處，切口長為30cm；

3)胎牛拉出子宮后,在潔凈室的層流罩下對胎牛進行心臟穿刺采血，心臟穿刺采血時采用消毒后的采血針，采血部位為胎牛的心臟，采血后立即將采集的血液輸入帶蓋瓶體，帶蓋瓶體的瓶蓋中部具有用于采血針穿過的小孔，待將采集的血液輸入瓶體后，將帶有采血針孔的瓶蓋更換為密封瓶蓋；

4)將步驟3)中的帶蓋瓶體放入冷凍離心機中，以3800轉/分的轉速離心35分鐘，析出的血清收集進已經過殺菌的容器內進行保存；

5)將步驟4)中的血清在凈化車間進行解凍，解凍溫度為恒溫27°；

6)對步驟5)中化開的血清進行過濾，從上到下依次三層微孔過濾膜進行3次過濾，過濾孔徑依次為0.1μm。即得胎牛血清。

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