色譜是一種分離分析手段,分離是核心,因此擔負分離作用的色譜柱是色譜系統的心臟。對糖和有機酸分析色譜柱的要求是柱效高、選擇性好,分析速度快等。其粒度一般為3,5,7,10μm等,柱效理論值可達5~16萬/米。對于一般的分析只需5000塔板數的柱效;對于同系物分析,只要500即可;對于較難分離物質對則可采用高達2萬的柱子,因此一般10~30cm左右的柱長就能滿足復雜混合物分析的需要。
糖和有機酸分析色譜柱是高效液相分離系統的中重要的環節,根據極性分為正相柱和反相柱。正相柱大多以硅膠為柱,或是在硅膠表面鍵合-CN,-NH3等官能團的鍵合相硅膠柱;反相柱填料主要以硅膠為基質,在其表面鍵合非極性的十八烷基官能團(ODS)稱為C18柱,其它常用的反相柱還C8,C4,C2和苯基柱等。
今天要與大家分享的是糖和有機酸分析色譜柱的操作方法,希望能夠幫助到大家:
1、在條件允許情況下,在使用前對新色譜柱按照說明書方法進行柱效測試,以確保其正常使用。
2、所有產品使用溫度應低于60℃。
3、將樣品溶解在流動相或極性相近的溶劑中。如果使用梯度洗脫,則需要將樣品溶解在初始流動相或極性相近的溶劑中。樣品溶液不應含有任何顆粒物,使用0.5μm或更小粒徑的濾膜過濾。樣品溶液如果使用強溶劑,為達到較好峰形,需要降低進樣量。
4、所有流動相,特別是含有緩沖鹽的流動相,當日實驗當日配制;如果使用了前日配制的流動相,請確保流動相pH值沒有變化,并確保流動相沒有長菌。流動相的pH值取決于您的應用和色譜柱填料類型。
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