色譜柱在液相系統中起著分離的作用,是液相色譜系統的核心部件之一。由于被分析樣品種類繁多,加之樣品基質復雜,色譜柱極易被強保留物質污染。甚至可能與填料發生相互作用導致填料變性,進而導致柱效下降,分離度降低和峰型異常等現象。因而液相色譜柱的維護是十分必要的。
溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會影響柱內的填充狀況;柱壓的突然升高或降低也會沖動柱內填料,因此,在調節流速時應該緩慢進行,在閥進樣時閥的轉動不能過緩。
2、應逐漸改變溶劑的組成 特別是反相色譜中,不應直接從有機溶劑改變為全部是水,反之亦然。
3、一般說來色譜柱不能反沖 只有生產者指明該柱可以反沖時,才可以反沖除去留在柱頭的雜質。否則反沖會迅速降低柱效。
4、選擇使用適宜的流動相(尤其是pH),以避免固定相被破壞。 有時可以在進樣器前面連接一預柱,分析柱是鍵合硅膠時,預柱為硅膠,可使流動相在進入分析柱之前預先被硅膠“飽和”,避免分析柱中的硅膠基質被溶解。
5、經常用強溶劑沖洗色譜柱,清除保留在柱內的雜質。 在進行清洗時,對流路系統中流動相的置換應以相混溶的溶劑逐漸過渡,每種流動相的體積應是柱體積的20倍左右。
1、避免壓力和溫度的急劇變化及任何機械震動
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