實驗室和醫院經常需要長期需要儲存細胞。常規做法是將其置于液氮中冷凍(在常壓下,液氮溫度為-196℃),令細胞處于休眠狀態,從而延長細胞的生命。
我們都知道,細胞培養環境需要嚴格的無菌,盡可能避免細胞出現各類污染狀況。細胞在長期儲存過程中,雖然置于密閉的凍存管內,對于外在環境的無菌要求,相對于37℃培養時會低一些,不需要嚴格的無菌,但依然要對液氮罐定期清潔,保證其潔凈、無雜物。
那么該如何對液氮罐進行有效清潔呢?
曾有研究人員用拭子涂抹取樣培養鑒定的方法,對使用超過一年以上的液氮罐進行檢測微生物,發現有被細菌、真菌,甚至是支原體污染的情況出現。
因此,要定期對液氮罐進行清潔。可在補充液氮前,對液氮罐進行清潔。具體做法如下:
1、將凍存的細胞轉移至另一潔凈的液氮罐中(盡量將所有配套器材全部更換為潔凈的,包括提籃和凍存盒)。
2、將待清潔的液氮罐中的液體倒出,靜置1-2天,待溫度恢復至0℃以上。
3、用常溫水沖洗,此時個別融化物質粘在內膽上,應盡量全部洗刷干凈(同時對液氮罐中提籃和凍存盒做同樣處理)。
4、再用中性洗滌劑輕柔擦拭液氮罐內壁和罐口部位,用水沖洗干凈(同時對液氮罐中提籃和凍存盒做同樣處理)。
5、建議用支原體祛除噴霧劑,對液氮罐內壁進行噴灑或擦拭(同時對液氮罐中提籃和凍存盒做同樣處理)。干燥后,倒入液氮,將細胞裝入凍存盒,放進液氮罐中即可。
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