久久无码人妻一区二区三区午夜_久久久久精品久久久久影院蜜桃_亚洲综合欧美色五月俺也去_交换娇妻呻吟声不停中文字幕

產(chǎn)品推薦:氣相|液相|光譜|質(zhì)譜|電化學|元素分析|水分測定儀|樣品前處理|試驗機|培養(yǎng)箱


化工儀器網(wǎng)>技術(shù)中心>操作使用>正文

歡迎聯(lián)系我

有什么可以幫您? 在線咨詢

有哪些方法可以進行蛋白純化

來源:上海閃譜生物科技有限公司   2024年12月04日 09:37  
  蛋白純化是生物化學和分子生物學研究中的一項基本技術(shù),用于從復(fù)雜的生物樣品中分離出目標蛋白質(zhì)。以下是對幾種常見蛋白純化方法的詳細描述:
  1. 沉淀法
  - 鹽析:通過增加溶液中的離子強度,降低蛋白質(zhì)的溶解度,使其沉淀。常用的鹽包括硫酸銨、氯化鈉等。
  - 有機溶劑沉淀:使用有機溶劑如乙醇或丙酮,降低蛋白質(zhì)的溶解度,促使其沉淀。
  - 酸堿沉淀:調(diào)節(jié)溶液的pH值,使蛋白質(zhì)在等電點附近沉淀。
  2. 層析法
  - 凝膠過濾層析:根據(jù)蛋白質(zhì)的分子大小進行分離,大分子蛋白質(zhì)先被洗脫出來。
  - 離子交換層析:根據(jù)蛋白質(zhì)的電荷差異進行分離,通過改變流動相的pH值或鹽濃度,使蛋白質(zhì)與離子交換劑結(jié)合或解離。
  - 親和層析:利用蛋白質(zhì)與特定配體的特異性結(jié)合進行分離,如酶與底物、抗體與抗原的結(jié)合。
  3. 電泳法
  - SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE):在變性條件下,根據(jù)蛋白質(zhì)的亞基大小進行分離。
  - 等電聚焦電泳(IEF):根據(jù)蛋白質(zhì)的等電點進行分離,蛋白質(zhì)在pH梯度中遷移至其等電點處聚焦。
  - 二維電泳:結(jié)合SDS-PAGE和IEF,先進行IEF分離,再進行SDS-PAGE分離,提高分辨率。
  4. 超濾和透析
  - 超濾:通過半透膜,根據(jù)蛋白質(zhì)的分子大小進行分離,小分子物質(zhì)通過膜,大分子蛋白質(zhì)被截留。
  - 透析:利用半透膜,通過擴散作用去除溶液中的小分子雜質(zhì),如鹽類、溶劑等。
  5. 高效液相色譜(HPLC)
  - 反相HPLC:根據(jù)蛋白質(zhì)的疏水性進行分離,非極性蛋白質(zhì)在柱上保留時間較長。
  - 尺寸排阻HPLC:根據(jù)蛋白質(zhì)的分子大小進行分離,類似于凝膠過濾層析。
  - 離子交換HPLC:根據(jù)蛋白質(zhì)的電荷差異進行分離,類似于離子交換層析。
  6. 磁性分離
  - 磁性親和層析:將親和配體固定在磁性顆粒上,通過磁場快速分離結(jié)合有目標蛋白質(zhì)的磁性顆粒。
  7. 溫度循環(huán)
  - 熱變性循環(huán):利用蛋白質(zhì)在不同溫度下的穩(wěn)定性差異,通過加熱和冷卻循環(huán),使雜質(zhì)蛋白質(zhì)變性沉淀,而目標蛋白質(zhì)保持活性。
  8. 金屬螯合親和層析
  - 金屬螯合層析:利用蛋白質(zhì)表面的氨基酸殘基與金屬離子的親和性進行分離,常用于純化帶有His標簽的重組蛋白。

免責聲明

  • 凡本網(wǎng)注明“來源:化工儀器網(wǎng)”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品,未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的,應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用,并注明“來源:化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者,本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責任。
  • 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源(非化工儀器網(wǎng))的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點和對其真實性負責,不承擔此類作品侵權(quán)行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時,必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源,并自負版權(quán)等法律責任。
  • 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題,請在作品發(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。
企業(yè)未開通此功能
詳詢客服 : 0571-87858618
主站蜘蛛池模板: 张家川| 星子县| 盐城市| 昌邑市| 昌图县| 荥阳市| 大洼县| 龙里县| 平谷区| 深泽县| 清原| 收藏| 浦江县| 金平| 左云县| 绥芬河市| 壤塘县| 土默特左旗| 苗栗县| 莱州市| 阳城县| 阳东县| 淮阳县| 张掖市| 茂名市| 定兴县| 镶黄旗| 灵川县| 吴桥县| 瓦房店市| 连南| 比如县| 宁陕县| 理塘县| 铁岭市| 宁城县| 康乐县| 沙坪坝区| 定结县| 阿勒泰市| 阳城县|