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生物過程中,PH電極的維護和保養方法

來源:北京科譽興業科技發展有限公司   2025年04月15日 10:08  

在生物過程中,pH電極的維護和保養直接影響其測量精度、響應速度及使用壽命。由于生物體系常含蛋白質、細胞碎片、微生物等污染物,且需經歷滅菌、長期在線監測等特殊場景,維護方法需結合其工況特點設計。以下是具體的維護保養策略:

 

一、日常使用維護(基礎保養)

 

1. 電極校準標準化

 

- 校準頻率:

 

- 在線監測:每批次生產前校準(如發酵罐接種前),或每24小時自動校準一次(配套控制系統)。

 

- 離線使用:每次使用前校準(至少兩點校準,pH4.01和pH7.01緩沖液,含溫度補償)。

 

- 校準注意事項:

 

- 校準液需新鮮配制(避免霉菌污染,建議每周更換),校準溫度與被測體系一致(溫差≤2℃)。

 

- 校準前用去離子水沖洗電極,并用軟紙吸干(勿擦拭玻璃膜,防止機械損傷)。


 

2. 避免機械損傷與污染

 

- 安裝與攪拌:

 

- 在線電極需配備保護套(尤其高攪拌環境),避免與罐體部件碰撞(如攪拌槳、擋板)。

 

- 攪拌速率穩定后再進行測量(減少湍流對電極膜的沖擊)。

 

- 接觸介質控制:

 

- 避免電極長時間接觸強酸堿(如pH>12或<2超過30分鐘),防止玻璃膜硅結構破壞。

 

- 非測量狀態下,電極需浸泡在保護液中(如3M KCl溶液),避免膜表面干燥(干燥會導致響應時間延長50%以上)。


 

二、定期深度保養(根據污染程度調整)

 

1. 清洗去污(核心維護步驟)

 

- 常規污染物(蛋白/細胞碎片):

 

- 清洗液:0.1M HCl + 胃蛋白酶溶液(5% w/v)或專用電極清洗液(如梅特勒-托利多EProbe Clean)。

 

- 方法:離線浸泡30~60分鐘(在線可通過CIP系統循環清洗15分鐘),然后用去離子水沖洗至中性。

 

- 頑固污染物(生物膜/無機鹽結晶):

 

- 堿性清洗:0.1M NaOH + 次氯酸鈉(0.5%)浸泡20分鐘(殺滅微生物并分解生物膜)。

 

- 酸性除垢:2%檸檬酸溶液浸泡(去除鈣鎂鹽結晶,適用于發酵罐結垢場景)。

 

- 清洗頻率:

 

- 普通細胞培養:每3天清洗一次;真菌/細菌發酵:每天清洗一次(因代謝產物污染更嚴重)。


 

2. 電解液與隔膜維護

 

- 參比電解液更換(針對可更換式電極):

 

- 發現電解液渾濁或液面低于刻度線時更換,使用高純3M KCl溶液(含AgCl飽和,避免氣泡殘留)。

 

- 更換后輕甩電極,確保隔膜微孔充滿電解液(避免氣泡導致液接電位不穩定)。

 

- 隔膜檢查:

 

- 觀察隔膜處是否有絮狀物堵塞,可用鑷子輕刮(陶瓷隔膜)或反沖(纖維隔膜,用注射器從尾部注入純水)。

 

- 嚴重堵塞時(響應時間>5分鐘),建議直接更換隔膜(不可更換式電極需整體更換)。

 


3. 滅菌與消毒處理

 

- 在位滅菌(SIP):

 

- 耐高溫電極(如玻璃膜材質):隨罐體121℃滅菌15~20分鐘,滅菌前確保電解液充滿且隔膜無氣泡。

 

- 滅菌后需重新校準(高溫可能導致膜特性輕微變化),并檢查電解液是否因蒸發減少(需補充至刻度線)。

 

- 離線消毒:

 

- 非耐高溫電極(如熒光法傳感器):用75%乙醇擦拭外殼,避免乙醇接觸玻璃膜(可能導致膜脫水)。

 

- 臨時污染處理:用0.1%過氧乙酸浸泡10分鐘(殺滅表面微生物,適用于細胞培養潔凈區)。


 

三、長期存儲與備用管理

 

1. 短期存放(<7天)

 

- 浸泡在3M KCl保護液中(避免使用純水,防止離子流失導致膜失效),存放于陰涼避光處。

 

- 每周更換一次保護液(防止細菌滋生污染隔膜)。

 

2. 長期存放(>7天)

 

- 先用去離子水沖洗干凈,再浸泡在飽和KCl溶液中(濃度穩定,防止膜脫水),密封容器存放。

 

- 超過1個月未使用,啟用前需用校準液活化2小時(或在緩沖液中攪拌30分鐘,恢復膜響應性能)。

 

3. 電極活化(針對老化或干燥電極)

 

- 干燥導致的響應變慢:浸泡在pH7.01緩沖液中4~6小時,期間輕輕晃動電極(加速膜層水合)。

 

- 膜性能衰退(斜率<52mV/pH):可嘗試用1:1的HCl和乙醇混合液浸泡30分鐘(修復輕微污染的玻璃膜),但此步驟僅適用于普通電極,精密電極建議直接更換。


 

四、特殊場景維護要點

 

1. 高粘度/顆粒體系(如真菌發酵)

 

- 增加清洗頻率(每次補料后清洗),選擇大孔徑陶瓷隔膜(減少堵塞風險)。

 

- 離線時用超聲波清洗儀(低頻模式,10分鐘)輔助去除膜表面顆粒(需避免劇烈振動損壞電極)。

 

2. 低溫環境(如冷鏈運輸監測)

 

- 避免電解液結冰(可使用乙二醇改良的KCl溶液,凝固點-10℃),測量前預熱至室溫(5~30℃)。

 

- 低溫下響應時間延長屬正常現象(無需特殊維護,恢復溫度后自動加快)。

 

3. 連續培養/灌流系統

 

- 集成自動清洗模塊(如每換液一次觸發清洗程序),使用非接觸式pH傳感器(如熒光法,減少膜污染)。

 

- 定期檢查電極支架密封性(防止培養基滲入參比系統,導致信號漂移)。


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