細胞發生凋亡時,由于胞漿和染色質濃縮、核碎裂,產生凋亡小體,使細胞的光散射性質發生變化。在細胞凋亡的早期,細胞對前向角光散射的能力顯著降低,對側向光散射的能力增加或沒有變化。在細胞凋亡的晚期,前向和側向光散射的信號均降低。因此可通過流式細胞儀測定細胞光散射的變化觀察細胞凋亡情況。
細胞凋亡檢測試劑盒通常應用于培養的貼壁或懸浮細胞的細胞周期與細胞凋亡檢測。如果用于組織的細胞周期與細胞凋亡檢測,則必須把組織消化成單細胞狀態,才可以進行檢測。
在使用細胞凋亡檢測試劑盒應注意的事項:
1、樣本處理:根據試劑盒要求,對細胞或組織樣本進行適當處理,如消化、固定、破膜等。
2、熒光染料選擇:若細胞本身帶有熒光,需選擇與細胞自發熒光不同檢測通道的熒光染料。
3、儀器配置:了解實驗室現有實驗儀器配置,確保能夠準確檢測熒光信號。
4、對照設置:設置適當的對照實驗,如陰性對照和陽性對照,以驗證實驗結果的準確性。
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