液相色譜儀的校準是一項復雜而重要的工作,需要嚴格按照操作規程進行,以確保儀器的準確性和可靠性。定期進行校準可以及時發現和解決儀器存在的問題,保證分析結果的質量,為科研和生產提供可靠的數據支持。
1.紫外檢測器校準
-波長準確性校準:使用具有已知吸收波長的標準物質,如重鉻酸鉀的硫酸溶液。將檢測器與記錄儀聯好,接通電源穩定后,先將檢測波長調至特定波長,如235nm,然后用流動相將標準物質注入檢測器,得到其吸收曲線。記錄實際波長,與標準波長進行對比,計算出波長示值誤差。重復測定多次,取各點差值即為波長重復性誤差。
-靈敏度校準:配制一系列不同濃度的標準溶液,在選定的波長下分別進行檢測。以濃度為橫坐標,吸光度為縱坐標繪制標準曲線。根據標準曲線的斜率和線性范圍,評估檢測器的靈敏度是否符合要求。如果靈敏度不足,可能需要調整燈的能量輸出或更換老化的燈泡等。
2.熒光檢測器校準
-激發波長和發射波長校準:選擇一種熒光特性已知的標準物質,如羅丹明B溶液。將熒光檢測器的激發波長和發射波長分別調至該標準物質的發射波長附近,然后進行掃描。記錄熒光強度隨波長變化的光譜圖,確定實際的激發波長和發射波長與標準值的差異,并進行相應的調整。
-靈敏度和線性范圍校準:制備不同濃度的標準熒光溶液,在固定的激發波長和發射波長下進行檢測。繪制熒光強度與濃度的標準曲線,檢查其線性范圍和相關系數。根據校準結果,對檢測器的增益、狹縫寬度等參數進行優化,以提高檢測的靈敏度和準確性。

液相色譜儀的使用注意事項:
-在進行任何校準操作之前,請務必遵守操作手冊和安全指南。
-確保實驗室內通風良好,以避免有害氣體的積聚。
-佩戴適當的個人防護裝備,如手套、護目鏡等。
-確保實驗室內的溫度和濕度穩定,避免對儀器性能產生不利影響。
-避免在有強烈振動或電磁干擾的環境中使用。
-定期清潔和維護,包括更換濾網、清洗流路等。
-檢查儀器的密封件和接頭是否緊固,防止泄漏。
-遵循制造商的建議進行儀器的保養和維修。
-使用高純度的試劑和溶劑,避免引入雜質或干擾物。
-確保樣品溶液的制備準確無誤,避免濃度誤差。
-對于易揮發或不穩定的樣品,請采取適當的保存措施。
-準確記錄所有校準數據和結果,以便后續分析和比較。
-如果發現異常數據或偏差較大的情況,請及時排查原因并重新校準。
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