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離心管在細胞復蘇與轉移過程中的功能

來源:上海聯碩生物科技有限公司   2025年04月29日 09:04  

細胞復蘇和凍存講究“慢凍快溶”,復蘇時一定要將凍存在液氮或-80℃中凝固的細胞凍存液快速融化至37℃,使胞外凍存時的冰晶迅速融化,避免冰晶緩慢融化時進入細胞形成再結晶,對細胞造成損害。

●打開水浴鍋加熱至37℃。

● 超凈臺上放好離心管(離心管規格選用15ml的),細胞培養瓶,移液管,紫外滅菌至少20至30分鐘,吹風5至10分鐘除去臭氧。

● 37℃預熱好要復蘇細胞的培養液,也可以不用預熱培養液,根據細胞情況選擇。

●向離心管中加約5至10ml培養液,從液氮罐或-80℃中取出凍存細胞,立即將凍存管放入37℃水浴中并輕輕搖動,待融化后(約2min即可)立即將解凍的細胞轉移至含培養液的離心管中,800-1000rpm下離心5min,棄上清,加適量培養液輕輕吹打重懸細胞后轉移至細胞培養瓶中,輕晃使瓶底液體分散均勻,標好細胞名稱、代數、復蘇日期,顯微鏡下觀察后放入37℃,5%CO2培養箱中。一般貼壁細胞過夜即可貼壁,換液和傳代時間根據不同細胞生長情況而定。


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