以下是ELISA試劑盒實驗前準備階段的常見問題及解決方案的整理:
一、試劑盒選擇與保存問題
試劑盒類型混淆?
未區分直接/間接/夾心ELISA試劑盒,導致實驗設計錯誤。
解決方案:根據檢測目標(抗原或抗體)選擇匹配的試劑盒類型。
試劑保存不當?
凍干標準品未在-20℃保存或反復凍融,導致活性喪失。
顯色劑未避光保存(如底物溶液變黃提示污染)。
二、樣本處理問題
樣本類型錯誤?
血清未離心直接使用(需3000rpm離心10分鐘取上清)。
組織樣本未充分勻漿(建議冰浴中機械勻漿10秒/次)。
樣本保存失效?
反復凍融導致蛋白降解(建議分裝保存,-80℃可存6個月)。
細菌污染(采集時需無菌操作,避免內源性酶干擾)。
三、實驗器材問題
器材未校準?
移液器誤差>5%(需定期校準,加樣時間控制在5分鐘內)。
酶標板未預處理(非即用型試劑盒需自行包被,選用ELISA板材)。
耗材污染?
使用普通EP管吸附蛋白(推薦硅化EP管減少吸附)。
洗板機殘留(手工洗板需垂直拍板,避免交叉污染)。
四、環境與操作問題
溫度控制不足?
試劑未室溫平衡(需提前20分鐘平衡,避免動力學差異)。
孵育溫度波動(需37℃恒溫,水浴需封閉防蒸發)。
操作不規范?
加樣順序混亂(需按說明書順序加樣,保證顯色時間一致)。
未穿戴防護裝備(需穿實驗服、戴手套口罩防污染)。
關鍵預防措施
標準品復溶?:凍干品需冰上溶解,靜置10分鐘輕搖混勻。
洗滌液配制?:20×濃縮液需1:20稀釋,避免結晶未溶。
陰性對照設置?:避免高濃度樣本污染空白孔。
通過規范操作和細節控制可顯著提升實驗成功率。
如需具體問題排查,可結合實驗步驟對照上述要點。注:以上資料僅供參考。
天津本生一直視質量控制為企業的生命,追求企業競爭力的不斷提升。公司在經營中始終秉承:遵紀守法,嚴于律己,寬仁以待,敢于承擔的企業精神作為標準,以過硬的質量和優良的服務來維護和拓展市場,較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏,是我們的發展目標。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作,共創美好的未來。
相關產品
免責聲明
- 凡本網注明“來源:化工儀器網”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網絡有限公司-化工儀器網合法擁有版權或有權使用的作品,未經本網授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經本網授權使用作品的,應在授權范圍內使用,并注明“來源:化工儀器網”。違反上述聲明者,本網將追究其相關法律責任。
- 本網轉載并注明自其他來源(非化工儀器網)的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網贊同其觀點和對其真實性負責,不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網站或個人從本網轉載時,必須保留本網注明的作品第一來源,并自負版權等法律責任。
- 如涉及作品內容、版權等問題,請在作品發表之日起一周內與本網聯系,否則視為放棄相關權利。