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液相色譜系統(tǒng)是一種重要的分析工具

來源:諳薩(上海)實業(yè)有限公司   2025年05月21日 15:21  
  液相色譜系統(tǒng)是一種在化學、生物、醫(yī)藥等諸多領(lǐng)域廣泛應(yīng)用的重要分析工具,它主要由多個關(guān)鍵部分協(xié)同工作來實現(xiàn)對混合物中各成分的分離與分析,其核心原理基于樣品中不同組分在固定相和流動相之間的分配差異。當流動相攜帶樣品通過裝有固定相的色譜柱時,各組分與固定相和流動相的作用力不同,導致它們在柱中的遷移速度不同,從而實現(xiàn)分離。
 
  液相色譜系統(tǒng)各流程之間的校準方法:
 
  1.流速校準:
 
  -稱重法:在一定的流速設(shè)置下,準確收集一段時間內(nèi)流出的流動相,通過稱重計算實際流速。例如,以甲醇為流動相,按設(shè)定流量,待流速穩(wěn)定后,在流動相排出口用事先清洗稱重過的容量瓶收集流動相,同時用秒表計時,準確地收集10 -25分鐘,稱重后根據(jù)流動相的密度計算實際流速,與設(shè)定流速進行比較,偏差應(yīng)在允許范圍內(nèi)。
 
  -儀器自帶校準功能:許多現(xiàn)代液相色譜儀具有自帶的流速校準程序,可按照儀器操作手冊中的說明進行操作,儀器會自動對流速進行校準和調(diào)整。
 
  2.檢測器校準:
 
  -波長校準(針對紫外 -可見檢測器等):使用合適的波長校準標準品,如鈥玻璃濾光片等,調(diào)整檢測器的波長,使其與標準品的特征吸收波長相符,以確保檢測器在不同波長下的準確性。
 
  -靈敏度校準:使用標準液進樣,設(shè)置合理的流速和檢測器參數(shù),調(diào)整檢測器增益,逐漸增大信號幅度,記錄增益值,并與儀器規(guī)格進行比較。
 
  3.進樣器校準:
 
  -對于手動進樣器,可使用微量注射器抽取已知體積的標準溶液,多次進樣,根據(jù)進樣后色譜峰的響應(yīng)值計算實際進樣量,與理論進樣量進行比較,評估進樣器的準確性和重復性。
 
  -對于自動進樣器,可通過設(shè)置不同的進樣量,連續(xù)多次進樣,檢查進樣量的準確度和精密度是否符合要求。同時,檢查進樣器的進樣順序、交叉污染等情況。
 
  4.保留時間校準:
 
  -使用含有多種組分的標準品溶液,通過比較標準品中各組分在液相色譜圖上的保留時間,對儀器進行校準??稍谙嗤纳V條件下,定期進樣標準品溶液,觀察保留時間的變化情況,若超出允許范圍,則需要進行調(diào)整。

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