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實驗用的抑制劑Cocktail怎么選? 抑制劑Cocktail常見問題解答

來源:MedChemExpress LLC   2025年05月28日 14:10  

抑制劑 Cocktails 是什么?

抑制劑 Cocktails 是各種化學抑制劑的混合物,用于阻斷細胞中的特定生物通路或過程。通常用于研究 和藥物開發,以研究抑制某些酶、信號通路或其他分子靶點的效果。 常見的抑制劑包括蛋白酶抑制劑、磷酸酶抑制劑、激酶抑制劑等。

 

抑制劑 Cocktails 應用場景 



① 蛋白質研究:

保持蛋白質的完整性并防止降解, 在蛋白質純化過程中抑制不必要的酶活性

 

② 細胞培養: 

通過阻斷參與細胞程序性死亡的途徑, 維持細胞活力或防止細胞凋亡(細胞死亡)

 

③ 酶學檢測: 

抑制背景酶活性, 確保準確測量特定酶反應

 

④ 組織保存: 

通過抑制導致組織分解 的酶來防止組織樣本降解

 

⑤ 信號轉導研究: 

阻斷特定的信號傳導途徑, 研究它們在細胞過程中的作用

 

 

MCE 抑制劑 Cocktails

抑制劑 Cocktails 產品包含多種不同的酶抑制劑,可同時抑制多種酶活性。這些抑制劑可以針對細胞 內的多個信號通路或生物過程進行干預,以實現更的生物學研究目的。

抑制劑 Cocktails 可以應用的實驗包括

免疫印跡 (Western Blot, WB),

免疫沉淀 (Immunoprecipitation, IP),

免疫共沉淀 (Coimmunoprecipitation, Co-IP), 

pull-down,

免疫熒光 (Immunofluorescence, IF),

免疫組化 (Immunohistochemistry, IHC),

激酶檢測等。

 

 

 

產品推薦

1、HY-K0010

蛋白酶抑制劑

Cocktail  (Solution, EDTA-Free, 100× in DMSO) 

Ingredient:AEBSF、Aprotinin、Bestatin 、E-64、Leupeptin 、Pepstatin A

Function:適用于所有蛋白樣品,可有效保護細胞及 組織裂解液中總蛋白的穩定

 

2、HY-K0011

蛋白酶抑制劑 片劑 (EDTA-Free)  Cocktail

Ingredient:AEBSF、Aprotinin、Bestatin、E-64 、Leupeptin

Function:一片可用于 10 mL 樣品, 適用于所有蛋白樣品, 可有效保護細胞及組織裂解液中總蛋白的 穩定簡單,便捷,便于保存

 

3、 HY-K0012

蛋白酶抑制劑 Cocktail, 細菌款 (EDTA-Free,100× in DMSO)

Ingredient:AEBSF 、Bestatin·E-64 、Pepstatin A

Function:用于細菌蛋白提取,可有效抑制細菌提取物中的 各種蛋白酶活性

 

4、HY-K0013

蛋白酶磷酸酶抑制劑  通用型 (EDTA-Free, 10× in ddH Cocktail, 2O)

Ingredient:Aprotinin、Bestatin、E-64、Leupeptin hemisulfate、β-Glycerophosphate、Sodium fluoride、Sodium orthovanadate、Sodium pyrophosphate   decahydrate

Function:質譜兼容,適用于所有蛋白樣品,可以有效 抑制常規的細胞或組織提取物中的各種蛋白酶 和磷酸酶

 

5、HY-K0021

磷酸酶抑制劑 Cocktail l  (100× in DMSO)

Ingredient:(-)-p-Bromotetramisole oxalate、Cantharidin 、Microcystin LR  Microcystis aeruginosa

Function:信號通路研究,可有效抑制堿性磷酸酶和絲氨酸/ 蘇氨酸磷酸酶,如:PP1、PP2A,用于維持蛋白 的磷酸化狀態

 

6、HY-K0022

磷酸酶抑制劑 Cocktail Ⅱ (100× in ddH2O)

Ingredient:Sodium fluoride 、Sodium orthovanadate、Sodium tartrate dihydrate、Sodium molybdate、Imidazole、

Function:信號通路研究,可廣譜抑制酸性、堿性和蛋白酪 氨酸磷酸酶 (PTPs),用于維持蛋白的磷酸化狀態

 

7、HY-K0023

磷酸酶抑制 Cocktail Ⅲ (100× in DMSO)

Ingredient:(-)-p-Bromotetramisole oxalate 、Cantharidin、Calyculin A

Function:信號通路研究,可有效抑制絲氨酸/蘇氨酸磷酸酶 和堿性磷酸酶,用于維持蛋白的磷酸化狀態

 

8、HY-K0017

激酶抑制劑 Cocktail

Ingredient:(-)-p-Bromotetramisole oxalate、Cantharidin、Calyculin A

Function:通用型蛋白激酶抑制劑,可用于檢測激酶活性

 

9、HY-K0030

去乙?;敢种苿?Cocktail  (100× in 70% DMSO)

Ingredient:Trichostatin A、EX-527、Nicotinamide 、Sodium butyrate

Function:用于維持蛋白的乙?;癄顟B

 

 

客戶驗證

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常見問題解答

 

1. 如何選擇適合實驗的抑制劑 Cocktail? 

根據實驗需求選擇適當的抑制劑 Cocktail。建議參考說明書抑制劑組分并根據實驗中的目標蛋白和需要 抑制的酶類型進行選擇。


2. 不同抑制劑 Cocktails 是否可以混用?MCE 的 3 種磷酸酶抑制劑如何選擇?

可以混用,需要注意不同抑制劑之間、抑制劑與實驗樣品之間的兼容性。MCE 的 3 種磷酸酶抑制劑, HY-K0021、HY-K0023 配方中含有天然化合物且不溶于水,溶劑選擇 DMSO。HY-K0022 含無機鹽 可溶于水,溶劑選擇超純水。HY-K0021 和 HY-K0023 均為 HY-K0022 的有效補充,使用時建議選擇組合 形式:HY-K0021 + HY-K0022 或 HY-K0022 + HY-K0023。也可以單獨使用,但不推薦。

 

3. 抑制劑 Cocktails 對樣品有何影響?

抑制劑 Cocktails 旨在保護樣品中的蛋白質,防止其被降解。正常使用時不會對樣品產生負面影響。若有 特殊樣品,可以行預實驗,觀察其對樣品的影響。

 

4. 使用抑制劑 Cocktails 時是否需要優化裂解緩沖液的配方? 

一般情況下不需要對裂解緩沖液的配方進行大幅度修改,但為了確保最佳效果,可以根據實驗需要對緩沖液 的 pH 值和成分進行微調。此外,加入抑制劑 Cocktails 時,確保其與裂解緩沖液充分混合以達到最佳 抑制效果。

 

5. 使用抑制劑 Cocktails 是否會影響下游實驗? 

正常使用情況下抑制劑 Cocktails 不會影響下游實驗,如 WB、IP 等。但需注意控制使用量,避免過量 干擾實驗。如果擔心對特定實驗步驟產生影響,可以進行預實驗來評估。

 

6. 抑制劑 Cocktails 是否對所有酶類都有效? 

MCE 抑制劑 Cocktails 含有多種抑制劑,能廣泛抑制蛋白酶和磷酸酶,但對于特定的酶類,可能需要補充 特異性抑制劑。

 

7. 何時添加抑制劑 Cocktails?抑制劑 Cocktails 的用量如何確定?

 對于樣品提取,應在實驗早期階段加入抑制劑 Cocktails,對于樣品裂解應在裂解緩沖液加入同時加入 Cocktails,以確保對酶活性的有效抑制。抑制劑 Cocktails 的用量一般會在產品說明書中給出推薦濃度。 通常情況下,少量即可發揮顯著效果。根據樣品的體積和實驗需求,按比例添加即可。

 

8. 發現抑制劑 Cocktails 抑制效果不理想,怎么辦? 

若發現 抑制劑 Cocktails 抑制效果不理想,可能是用量不足、添加時間不對或需要補充特定的抑制劑。 可以嘗試增加用量、調整添加時間或調整抑制劑種類。

 

9. 如何保存抑制劑 Cocktails? 

常規溶液形式的抑制劑 Cocktails 應在 -20°C 儲存,避免反復凍融。使用時建議現配現用,可適當分裝后 保存,減少凍融次數。蛋白酶抑制劑 Cocktail,片劑 (HY-K0011) 4°C 儲存即可。

 

10. 抑制劑 Cocktails 均為 1 mL 包裝,能否提供大包裝? 

MCE 抑制劑 Cocktails 以儲液形式提供,實驗需進一步稀釋,大包裝會增加污染風險,同時凍融次數增加 也可能會影響后續抑制效果,因此常規規格為 1 mL。MCE 也可根據需求提供大包裝定制規格。

 

 

客戶驗證文獻

[1] Nature. 2025 Mar;639(8054):438-446

[2] Nat Immunol. 2025 Mar;26(3):391-403.

[3] Nature. 2025 Feb;638(8052):1112-1121.

[4] Cell. 2025 Jan 9;188(1):157-174.e22.

[5] Cell. 2024 Sep 19;187(19):5238-5252.e20.

[6] Signal Transduct Target Ther. 2025 Mar 5;10(1):79.

[7] Cell Metab. 2025 Jan 10:S1550-4131(24)00482-0.

[8] Nat Biomed Eng. 2025 Feb;9(2):201-214.

[9] ACS Nano. 2025 Mar 19.

[10] Nat Commun. 2025 Mar 8;16(1):2333.

[11] Cell. 2024 Oct 31;187(22):6251-6271.e20.

[12] Cell. 2024 Sep 19;187(19):5238-5252.e20.

[13] Cancer Cell. 2024 Jun 10;42(6):968-984.e9.

[14] Nature. 2023 Apr;616(7956):357-364.

[15] Nature. 2023 Mar;615(7952):526-534.

[16] Nature. 2023 Mar;615(7951):349-357.

 

 





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