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色譜法又稱層析法，系1906年由俄國植物學家Mikhail Tswett所*，系分離植物色素時采用的一種技術。自那時以來，已發展成各種類型的色譜技術，如柱、紙、薄層、氣相及液相色譜等各種技術類型。現將氣相色譜技術（gas chromatography, GC）簡介如下：
（一） GC技術檢測的基本原理
使被檢混合物中的各組分在固定和流動兩相間進行流動分配，其中一相是不動的，構成所謂的固定相，另一相則是推動混合物經過固定床的流體，稱作流動相，當流動相中所含的混合物經過固定相時，就會與固定相發生相互作用，從而使混合物中的各個成分得到分離。作為流動相的物質有氣體和液體，當用液體作為流動相時，則稱為液相色譜，當用氣體（即載氣，如氮、氫、氦、氬、氖、氧、CO、CO2、CH4等）為流動相時，則稱為氣相色譜。
液相色譜和氣相色譜是色譜分離技術的兩大分支，現就常用于檢定細菌的GC檢測流程簡述如后：先將載氣如氮與由注射器引入的被檢標本混合后，送入加熱爐內，于0.1～10秒內加熱400～900℃，將標本熱解后，使產生的混合氣體與載氣一起通過色譜柱（用金屬或玻璃制成，柱長2～4m，內徑2mm）中的固定相載體（是一種惰性物質，為多孔性的固相顆粒，如聚乙二醇、甲基硅酮和白色硅藻土等），則標本中的各個成分即被載氣流在柱內所分離，先后流出柱外，當流出柱外的組分進入末端的檢測器時，即在記錄儀上，繪制出以曲線圖表示的特征性信號。
（二） GC技術的應用
以細菌自身的化學成分、代謝產物或分解產物作為檢測的對象。
1. 細菌化學成分的分析對完整細菌細胞化學成分的分析，要有大量的純培養物，以用做細菌的檢測，并借特殊的熱解法或水解法來完成。
2. 細菌代謝產物的分析采用乙醚提取細菌培養物作GC分析，獲得的代謝產物有醋酸、丙酸、丁酸、乙醇、雙乙酰、3羥基丁酮和2，3丁烯二醇等，均具有細菌屬甚至種的特征。為了產生能提供GC分析的代謝產物，應用的培養基必須含有使細菌生長良好的碳源、氮源、鹽類和生長因子等。另外，在檢測時，必須先對未接種的培養基中含有的各種化合物進行基礎水平的檢查，以排除本底對鑒定細菌的干擾。
3. 對臨床標本的鑒定純培養物或臨床標本中存在的細菌，可以產生一種或多種與病原菌鑒定有關的特殊化合物，因此可應用GC對存在于血液或尿液標本中的特殊化合物進行分析，通過獲得的Rt（保留時間）值或RRt值（相對保留時間）對細菌作鑒定。還可將被檢查的細菌先感染大鼠，采取其血清進行GC分析，也能獲得區別于其他細菌的“特征峰”。
應用GC作為細菌的檢測工具，始于Oyama,現已試用于對微球菌、分枝桿菌、需氧芽胞桿菌、綠膿桿菌、腸道桿菌、鏈球菌和類桿菌等標本的鑒定，均獲得了較好的檢測結果。另外，以GC作為敗血癥、菌血癥快速診斷的探索性研究工作，近年來也正在進行，從分析為數不多的病例來看，描繪的GC圖譜也具有較佳的效果。
（三） GC技術的特點 色譜技術自問世以來的90年代左右的時間中，幾經重大改進，目前已成為對細菌快速檢驗工作中具強大生命力的檢測技術，其檢測價值日漸為大家所接受，該技術的特點是：
1. 重復性好 只要在標準條件下操作，即可獲得穩定的結果，表現出的可重復性，如細菌培養物經過乙醚提取一次后，即可產生出據以鑒定該種細菌的特異性產物，在繪制的色譜圖中即可表現出來。
2. 敏感性高 該技術能夠分離和檢測毫微量范圍細菌或代謝產物的含量，如與ECD（electron capture detector,電子俘獲檢測器）等適當的檢測器聯用，其敏感性可提高到能檢測出某些細菌產生的幾個微微克的3-羥基丁酮或雙乙酰的水平，即相當一個細菌細胞產生的代謝產物，在GC圖上便可顯示出具有鑒定意義的圖像。另外，本法還可測出小量細菌僅經1～2小時培養后產生的代謝產物。所以說該法是目前檢測微量化合物中*的超敏感技術。
3. 速度快它只需幾十分鐘至數小時，便可對被檢標本作出診斷，明顯地節省了常規方法因分離培養、生化反應和血清學反應等所花費的許多時間，這對于臨床工作及時采取有力的防治措施是非常有利的。
然而，GC也與其他所建立的快速檢驗技術一樣，同樣存在著目前還難以克服的一些缺點，一是在方法上不易標準化，如柱成分、時間和溫度等的變化，均直接影響著檢驗結果的準確性；二是檢測的重復性，可因提取方法的改變而受到影響；三是描繪的色譜圖，可因患者的用藥、重復感染或隱性感染等因素，影響標本的檢測結果。
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