| I. Background | |
干擾素（IFN）是一種由單核細胞和淋巴細胞產生的具有多種功能的可溶性糖蛋白，是先天和適應性免疫的關鍵效應分子。IFN 細胞因子根據其結合的不同干擾素受體分為三種類型：I 型、II 型和 III 型。Ⅰ型干擾素的分類較多，包括 IFN-α、IFN-β、IFN-δ、IFN-κ、IFN-ω、IFN-τ、IFN-ε、IFN-ξ 等；Ⅱ型干擾素為 IFN-γ；Ⅲ型干擾素即 IFN-λ，包括IFN-λ1、IFN-λ2 及 IFN-λ3。Ⅰ型干擾素主要功能是抗病毒及抗腫瘤，Ⅱ型干擾素主要功能是誘導主要組織相容性復合體（MHC）類抗原的表達和免疫調節效應，但其抗病毒作用比Ⅰ型干擾素弱。Ⅲ型 INF 為 2003 年發現的一種新型干擾素，具有廣譜的抗病毒及免疫調節活性。 配體結合后，I 型和 II 型受體均被激活，導致受體亞基二聚化和重排，從而通過自身磷酸化激活相關 JAK，并進一步激活 STAT 蛋白。磷酸化后，激活的 STAT 形成同型二聚體，然后轉位到細胞核中，在那里啟動 IFN 刺激基因的轉錄。 I 型干擾素還可誘導 ISGF3 復合物的形成，該復合物由 STAT1、STAT2 和 IRF9 組成。ISGF3 復合物與 ISRE（干擾素刺激反應元件）結合，進一步誘導啟動子內含有 ISRE 的干擾素刺激基因的轉錄。 IFNγ 與 IFNγ 受體結合導致下游 STAT1 在 Tyr701 位點發生磷酸化。產生磷酸化的 STAT1 同型二聚體轉位至細胞核并與 GAS（IFNγ 激活位點）元件結合，從而誘導 IFNγ 調控基因的表達。 | |
| II. Description | |
ISRE-Luc RAW264.7 報告基因細胞是由 ISRE 調控并表達 Luc 熒光素 酶報告基因的 RAW264.7細胞。RAW264.7 是小鼠巨噬細胞的常用模型，用于研究細胞對微 生物及其產物的反應。RAW 264.7 衍生細胞內源性表達許多 PRR，包括 toll 樣受體 （TLR）、 NOD 樣受體 （NLR）、RIG-I 樣受體 （RLR） 和 C 型凝集素受體 （CLR）。STING 激活的 原理見下圖所示。  Figure 1：ISRE-Luc THP-1 細胞模型原理圖 | |
| III. Introduction | |
| Host Cell: | Raw264.7 |
| Expressed gene: | ISRE |
| Stability: | 32 passages (in-house test, that not means the cell line will be instable beyond the passages we tested.) |
| Freeze Medium: | 90% FBS+10% DMSO |
| Culture Medium: | DMEM+10%FBS+200ug/ml zeocin |
| Mycoplasma Testing: | Negative |
| Storage: | Liquid nitrogen |
| Application(s): | Functional(Report Gene) Assay |
| IV.. Description of Host Cell Line | |
| Organism: | Mus musculus, mouse |
| Tissue: | Abelson murine leukemia virus-induced tumor; ascites |
| Disease: | Abelson murine leukemia virus-induced tumor |
| Morphology: | Monocyte/macrophage |
| Growth Properties: | Adherent |
| V. Representative Data | |
Figure 2. Detect Luciferase assay by Ultra Luciferase Detection Kit CBPH0001（we strongly suggest to purchase from Cobioer). Dose Response of 2'3-cGAMP in ISRE-Luc RAW264.7(C1). | |
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