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小膠質(zhì)細(xì)胞特異性抗體

兔源Iba1抗體，無標(biāo)簽

Iba1是在巨噬細(xì)胞/小膠質(zhì)細(xì)胞中特異性表達(dá)的分子量為17,000的鈣結(jié)合蛋白。近來小膠質(zhì)細(xì)胞備受關(guān)注，除了在神經(jīng)營養(yǎng)/神經(jīng)保護(hù)中起作用外，也已被證實(shí)通過產(chǎn)生NO，TNF-α和IL-1β對神經(jīng)造成損傷。

該產(chǎn)品是與小膠質(zhì)細(xì)胞特異性反應(yīng)的兔多克隆抗體，適用于與星形膠質(zhì)細(xì)胞特異性抗GFAP單克隆抗體進(jìn)行雙染色。

◆特點(diǎn)

●抗原：對應(yīng)于Iba1的C末端的合成肽
●形式：TBS溶液（1 mg/mL）
●純化：兔抗血清的抗原親和層析純化

●特異性：對小膠質(zhì)細(xì)胞和巨噬細(xì)胞具有特異性，但不與神經(jīng)元和星形膠質(zhì)細(xì)胞發(fā)生交叉反應(yīng)。

與人類，小鼠大鼠Iba1反應(yīng)。
●用法：

1.抗Iba1，兔（免疫細(xì)胞化學(xué)）適用于免疫細(xì)胞化學(xué)。1-2 μg/mL使用

2.抗Iba1，兔（用于Westernblotting）適合于Western blotting（免疫印跡）。0.5-1 μg/mL使用。

◆應(yīng)用

大鼠原代混合培養(yǎng)細(xì)胞雙染色和相同視野的相位圖像

◆免疫印跡實(shí)驗(yàn)

◆推薦準(zhǔn)備工作

a）石蠟切片

1.脫蠟
100％二甲苯10分鐘，2次
⇓
100％乙醇5分鐘，2次
⇓
80％乙醇5分鐘
⇓
70％乙醇5分鐘
⇓
dH2O，5分鐘，2次
 

2.用0.01M PBS洗滌，2次

3.在0.3％H2O2的甲醇溶液中孵育30分鐘

4.用0.01M PBS洗滌，3次

5.室溫（RT）下用封閉緩沖液（1.5％正常山羊血清和0.001M PBS的1％BSA）孵育2小時。

6.4℃下在封閉緩沖液中與抗Iba1抗體（0.5 μg/mL）（Wako目錄號019-19741）孵育過夜。

7.用0.01M PBS洗滌，3次。

8.與生物素化的抗兔IgG抗體（1:200）在封閉緩沖液中室溫孵育1小時。

9.用0.01M PBS洗滌，3次。

10.室溫下與Elite ABC試劑（0.01M PBS中的試劑A（1:50）和試劑B（1:50））孵育1小時。

11.用0.01M PBS洗滌，3次

12.在過氧化物酶溶液中孵育（0.05M Tris緩沖液的0.01％過氧化氫和0.05％DAB）

◆實(shí)驗(yàn)步驟鏈接

b）冰凍切片
冷凍的小鼠腦組織或培養(yǎng)的細(xì)胞應(yīng)用4％多聚甲醛-PBS灌注固定。然后制備組織切片。制備后，將組織切片和培養(yǎng)的細(xì)胞用抗Iba1抗體免疫染色。

◆產(chǎn)品列表

兔源Iba1抗體，無標(biāo)簽