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詳細介紹
AMV來源重組逆轉錄酶
本產品是來源于大腸桿菌表達的Avian Myeloblastosis Virus（AMV）的重組逆轉錄酶，酶活性高，能夠高靈敏度地檢測出RNA。
該酶在引物存在時，以單鏈RNA和單鏈DNA作為模板合成DNA。由于它具有解鏈活性和分解雙鏈RNA-DNA中RNA的RNase H活性，因此可以高效地進行RT-PCR。可應用于first strand cDNA合成、制備cDNA探針、RT-PCR。
◆特點
● 高靈敏度檢測RNA
● 長鏈RNA的逆轉錄
● 熱穩定性高
● GC-rich RNA的逆轉錄
◆應用
● RT-LAMP法
● 合成first strand cDNA
● 制備cDNA探針
● 應用于RT-PCR
來源 | Escherichia coli (Recombinant) |
活性 | 20 units/μL |
反應溫度 | 42°C-65°C |
單位定義 | 1 unit指以poly(A)/(dT)15為模板/底物，在37°C，10 min的條件下將1 nmol 的脫氧核糖核苷酸攝入酸不溶性沉淀物中的活性 |
純度試驗 | DNase試驗、RNase試驗 |
◆產品組成
AMV Reverse Transcriptase （500 units）
組成內容 | 包裝 | 儲存 | 備注 |
AMV Reverse Transcriptase (20 units/μL) | 500 units × 1 | -20°C | 200 mmol/L磷酸鈣（pH 7.2，25°C）， 2 mmol/L DTT、0.2% Triton X-100, 50% Glycerol |
5xAMV RT Reaction Buffer | 1 mL× 1 | -20°C | 250 mmol/LTris-HCl（pH 8.5，25°C）、 150 mmol/LKCl, 40 mmol/L MgCl2 |
◆應用實例
實驗案例 Isothermal Master Mix合用（高靈敏檢測RNA）
用ISOGEN從感染瓜類褪綠黃化病毒（簡稱CCYV）的蜜瓜葉中提取RNA，將提取的RNA溶液作為模板使用。用等溫基因擴增試劑Isothermal Master Mix和一組引物擴增目標區域，然后用等溫擴增熒光檢測裝置Genie® II檢測出了CCYV RNA。
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<反應條件>
Isothermal Master Mix 15 μL
AMV RT 0.25 units
引物 2.5 μL
模板RNA 2 μL
反應體積 25 μL
擴增： 63°C 30 min
※ 檢測瓜類褪綠黃化病毒的引物為獨立行政法人農業、食品產業技術綜合研究機構九州沖繩農業研究中心在推進新農林水產政策的實用
※ 技術開發產業“開發以粉虱為媒介的新型瓜類蔬菜病毒病的綜合性防治技術系統”中開發的產品。
結果
由于Isothermal Master Mix中含有的DNA聚合酶具有逆轉錄活性，即使不添加逆轉錄酶也能檢測出RNA，但通過添加本產品，可提高檢測速度。另外，模板RNA量為0.5 ng時也能使目標區域擴增（綠色實線）。
備注
本產品為實驗研究用試劑。不可作為醫藥品使用。
◆產品列表
產品編號 | 產品名稱 | 包裝 |
311-07501 | AMV逆轉錄酶 | 500 units |
◆相關產品
產品編號 | 產品名稱 | 包裝 |
316-08151 | GeneAce Reverse Transcriptase | 10,000 units |
312-08153 | 10,000 units × 5 | |
313-08161 | M-MLV Reverse Transcriptase | 10,000 units |
319-08163 | 10,000 units × 5 |