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支原體污染解決方案

支原體污染在世界范圍內的細胞實驗室中，屬于比較常見的一類污染。細胞污染一旦污染了支原體，會給細胞培養帶來一系列嚴重的后果。

本期內容，就細胞培養過程中，支原體污染的危害、如何預防支原體污染、如何祛除支原體污染做解讀。

一

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支原體污染的危害

支原體個頭很小，可以感染多種真核細胞系，包括研究中常用的人類和動物細胞系。雖然支原體感染的前期，可能并不總是導致受感染細胞發生明顯變化，但它會對細胞生理學和實驗結果產生重大影響。

支原體影響細胞生長的主要方式之一是改變細胞代謝。支原體已被證明會耗盡培養基中的葡萄糖和氨基酸等營養物質，從而導致細胞生長和增殖減少。此外，支原體會產生對細胞有毒的代謝廢物，例如過氧化氫和氨。

支原體感染還可以改變受感染細胞中基因和蛋白質的表達。研究表明，支原體可以誘導基因表達和可變剪接的變化，從而導致蛋白質表達和細胞功能的改變。例如，支原體感染已被證明可以下調參與細胞周期調節的基因，并上調參與炎癥和免疫反應的基因。

支原體影響細胞生長的另一種方式是誘導細胞應激反應。支原體感染已被證明可激活細胞應激通路，如未折疊蛋白反應和自噬，這可導致細胞功能改變和細胞活力降低。

支原體還會影響受感染細胞在檢測和實驗中的行為。支原體污染會導致實驗結果的可變性增加、再現性降低以及假陽性或假陰性結果的產生。此外，支原體可以改變細胞對藥物和其他刺激的反應，這可能導致關于藥物療效或毒性的錯誤結論。

總之，支原體污染會對細胞生長和行為以及實驗結果產生重大影響。研究人員應采取適當措施預防、檢測支原體污染。

二

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支原體污染的預防

防止支原體污染的第一步是保持無菌實驗室環境。所有設備和表面都必須使用適當的試劑定期清潔和消毒，培養箱水槽等水浴環境，也應防止消毒劑成分。此外，在處理細胞培養物時應佩戴手套和實驗室外套等個人防護設備，以防止意外污染。

德國Minerva Biolabs生產

支原體祛除噴霧

Mycoplasma-off

德國Minerva Biolabs生產

水槽支原體預防試劑

Water Shield

另一個重要措施是在細胞培養過程的所有步驟中使用無菌試劑和培養基。這包括使用無菌移液器、過濾器和其他一次性設備。所有培養基和試劑都應適當儲存以防止污染。

應盡可能使用之前經過測試和證明不含支原體的細胞系。定期檢測細胞培養物是否存在支原體污染也很重要，即使使用經過認證的細胞系也是如此。

三

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支原體的檢測

如何檢測支原體前期內容我們也有詳細講過，有常規PCR檢測試劑盒以及qPCR檢測試劑盒兩大類可供選擇。

具體內容可以參考下面這篇文章：

『支原體檢測方法』到底應該怎樣選？

四

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支原體的祛除

如果在細胞培養物中檢測到支原體污染，必須立即采取措施消除污染。第一步是將受影響的培養物與其他細胞培養物隔離，以防止污染擴散。

受影響的培養物應該被丟棄，并對環境進行清潔，參考支原體預防這一章節的內容。新的培養物應該從冷凍儲備或無支原體細胞系開始。

針對不同類型的培養物，還可選擇用于細胞中的支原體祛除試劑：

Zell Shield

對于費力擴增的細胞（如已染，或經過體外刺激），如果細胞中發現有支原體污染，但此細胞又不愿丟棄，希望繼續培養，推薦使用MB公司生產的復合抗生素Zell Shield。

Mynox

無法長期培養的珍貴樣本或病毒收獲液，則推薦使用德國MB公司的Mynox® ，處理3小時，直接殺除。

Mynox Gold

可以培養超過一個月的細胞，則推薦使用德國MB公司的Mynox® Gold，直接殺除+鞏固防護兩步處理。