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吡啶核苷酸在代謝中起著重要作用,因此,人們對監測其濃度水平一直感興趣。NAD+/NADH的定量測定在細胞或組織的能量轉化和氧化還原狀態的研究中有應用。測量NAD+/NADH濃度的簡單、直接和自動化程序是非常理想的。Assay Genie ChromaDazzle NAD/NADH比率檢測試劑盒基于乳酸脫氫酶循環反應,其中形成的NADH還原甲氮(MTT)試劑。在565nm處測量的降低的產物顏色的強度與樣品中的NAD+/NADH濃度成比例。該測定法對NAD+/NADH具有高度特異性,NADP+/NADPH的干擾極小(<1%)。我們的測定法是一種測量NAD、NADH及其比值的方便方法。
艾美捷 NAD/NADH比率測定試劑盒:
目錄代碼:BA0067
包裝尺寸:100assays
僅供研究使用
應用直接分析:細胞或組織提取物中NAD+/NADH的濃度和比率。
NAD/NADH比率測定試劑盒主要功能:
1、靈敏準確。在96孔板法中,檢測限為0.05 mM,線性高達10μM NAD’/NADH。實用的該程序包括添加一種工作試劑,并在室溫下讀取時間零點和15分鐘的光密度。
2、高吞吐量。可作為每天數千個樣品的高通量96孔板法容易地自動化。
儲存條件。這套裝備是用冰塊裝運的。將所有試劑儲存在-20°C溫度下。保質期:收到后6個月。
注意事項:試劑僅供研究使用。使用試劑時,應采取實驗室試劑的常規預防措施。有關詳細信息,請參閱材料安全數據表。
一般注意事項:
1.在這些濃度下,NAD和NADH的標準曲線是相同的。由于溶液中的NADH不穩定,我們只提供NAD作為標準品。
2.該測定基于酶催化的動力學反應。工作試劑的添加應迅速,混合應簡短但徹-底。建議使用多通道移液器。
3.以下物質會干擾樣品制備,應避免使用。EDTA(>0.5 mM)、抗壞血酸、SDS(>0.2%)、疊-氮-化-鈉、NP-40(>1%)和Tween-20(+1%)。
4.對于丙酮酸鹽含量高于100μM的樣品,我們建議使用內標。
96孔板法的標準曲線:
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