三維凝膠可以用于研究細胞發育、遷移和形態的機械性質對細胞外基質(ECM)的影響,如密度和剛度。與二維系統不同,三維環境使細胞伸展能夠同時與細胞表面的整合素相互作用,從而激活特定的信號通路。凝膠的剛度或剛性在三維環境與二維環境中對細胞遷移產生不同的影響。此外,在三維系統中,還可能出現與整合素無關的機械相互作用,這是由于基質纖維與細胞伸展物相互交織,而在二維系統中,細胞附著在平坦表面上,無法發生這種情況。
Advanced BioMatrix/艾美捷PhotoCol 甲基丙烯酸膠原蛋白,100 毫克,含LAP套件(ABM-5270-1KIT),一種純化的甲基丙烯酰化I型牛膠原套裝,可在不同濃度下制備,并通過藍光交聯,提供類似天然的可調節的三維膠原凝膠。PhotoCol®套裝由純化的甲基丙烯酰化I型牛膠原作為核心成分,配合套裝中的其他支持試劑。
甲基丙烯酰化的I型膠原蛋白是由保留端肽完整的牛膠原產生的,其中膠原蛋白經過改性反應,主要是對賴氨酸殘基的ε-氨基基團以及N-末端的α-氨基基團進行反應修飾。膠原蛋白分子中超過20%的賴氨酸殘基已經進行了甲基丙烯酰化。
膠原蛋白是從牛皮中提取的,含有高含量的單體。膠原蛋白的起始原料是從一個封閉的養殖群體中分離出來的,并通過受控制的制造過程進行純化。20毫摩爾乙酸溶液用于在濃度范圍為3至8毫克/毫升的情況下使凍干的甲基丙烯酰化膠原蛋白溶解。中和溶液由堿性的10倍磷酸鹽緩沖鹽溶液(PBS)組成,在最終混合物中提供生理鹽和中性pH值。光引發劑溶液由LAP組成,可以在1倍PBS或細胞培養基中配制,以便在405納米處對膠原蛋白進行藍光光交聯。為了進行滅菌處理,需要重新懸浮并通過0.2微米的按鈕過濾器進行過濾。
Advanced BioMatrix PhotoCol 甲基丙烯酸膠原蛋白,100 毫克,含LAP套件存儲說明:
存儲/穩定性:產品在冷凍凝膠包裝上發貨。收到后,將膠原蛋白、乙酸和光引發劑存放在2至10攝氏度的溫度下,不要冷凍。將中和溶液存放在室溫下。產品標簽和適用的分析證書上印有有效期限。有效期適用于按照指示進行處理和儲存的產品。在使用乙酸溶解膠原蛋白后,當在2至10攝氏度下儲存時,膠原溶液可以穩定保存2個月。
凝膠硬度:PhotoCol®試劑盒旨在提供基于膠原蛋白濃度和交聯的不同硬度的膠凝膠。光強度、蛋白質濃度、光引發劑濃度、光交聯時間和其他變量將影響聚合性能。
制備說明:
注意:在制備和處理膠原蛋白和其他溶液的過程中,采用無菌操作以保持產品的無菌性。
注意:建議在制備膠原蛋白時將膠原蛋白和其他工作溶液冷藏并放在冰上。
注意:不建議在任何步驟中使用渦旋混合。
注意事項和免責聲明:
本產品僅供研發使用,不用于人類或其他用途。有關危險和安全操作規程的信息,請參閱材料安全數據表。
文獻參考:
1. Gaudet, I. D., Characterization of MethacryatedType-I Collagen as a Dynamic PhotoactiveHydrogel, Biointerphases, 2012 Dec; 7(1): 25.
2. Drzewiecki K. E., Methacrylation Induces Rapid,Temperature-Dependent, Reversible Self-Assemblyof Type-I Collagen, Langmuir. 2014 Sep 23; 30(37):11204–11211.
Advanced BioMatrix是3D組織培養、細胞檢測和細胞增殖等領域實驗解決方案的佼-佼-者,在分離、純化、凍干、細胞培養和蛋白檢測、多肽粘附、附著因子、基質硬度和其他3D matrix 產品開發方面有著豐富的經驗。競爭優勢:
提供高純度和成分確定的胞外基質;
超過1000余篇文獻引用PureCol 膠原產品,品質非常均一;
在3D培養基領域可提供全面的產品線;
可提供特異性剛性有機硅基板的公司(CytoSoft);
可提供可溶性絲纖蛋白的供應商(可運用于多種3D培養);
如果客戶首-次接觸3D膠原凝膠,Advanced BioMatrix是預制膠原蛋白(PureCol EZ gel)供應商。
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