HMGB1是一種25 kDa的核蛋白,存在于幾乎所有哺乳動物細胞中。該蛋白在人類、小鼠、大鼠中幾乎相同(213/215個氨基酸)。本產品對應大鼠序列,在大腸桿菌中產生。全部還原的HMGB1(完整命名:HMGB1C23hC45hC106h - Antoine J.等人(2014年)。MolMed)與CXCL12形成復合物并具有趨化活性。當給予目標細胞時,它不會誘導細胞因子/趨化因子的分泌。該產品僅含有微量的LPS(<0.4 ng/mg蛋白),并且已測試其誘導成纖維細胞遷移的能力。
試劑格式:HMGBiotech提供的wan全還原型HMGB1是天然蛋白,沒有標簽或額外的氨基酸。wan全還原型HMGB1從50 mM HEPES緩沖液,pH 7.9,500 mM NaCl和0.5 mM DTT中凍干。
儲存:2-8°C。一旦蛋白重懸,可以冷凍儲存(-20°C)。
氧化的半胱氨酸106使蛋白失活(Kazama等人,Immunity 2008; 29, 21-32)。為了避免半胱氨酸氧化,在蛋白純化過程中添加了0.5 mM DTT。
如何使用產品:該產品可用于細胞遷移實驗,包括體外和體內;Z大活性為1 nM(Palumbo等人,2004年)。在小鼠腹腔注射可招募中性粒細胞、單核細胞和巨噬細胞(Penzo等人,2010年)。
艾美捷 HMGBiotech-HMGB1亞型試劑盒是一個探索性試劑盒,用于測試HMGB1的不同氧化還原亞型。
試劑盒包含3種不同的HMGB1亞型:
全部還原的HMGB1
含有二硫鍵的HMGB1
末端氧化的HMGB1
不同的HMGB1活性已被歸因于結合到特定受體的不同生化形式(Yang等人,2012年)。
全部還原的HMGB1的所有三個半胱氨酸都wna全還原,并通過與趨化因子CXCL12形成異質復合物并通過CXCR4信號傳導,成為許多細胞類型的強效趨化劑(參見PMCID: PMC3302219)。
含有二硫鍵的HMGB1在半胱氨酸C23和C45之間含有二硫鍵,并作為促炎介質通過結合到TLR4和RAGE受體發揮作用(Yang等人,2012年;Tirone等人,2018年)。
末端氧化的HMGB1的所有半胱氨酸都被氧化成磺酸鹽,既沒有趨化活性也沒有細胞因子刺激活性(Kazama等人,2008年;Yang等人,2012年)。它可以作為你實驗中的陰性對照。
我們提供的蛋白質是天然蛋白質,沒有標簽或額外的氨基酸。
HMGB1同種型試劑盒(#HM-030、HM-031)相關參數:
HMGB1的序列為:
["MGKGDPKKPR GKMSSYAFFV QTCREEHKKK HPDASVNFSE FSKKCSERWK TMSAKEKGKF EDMAKADKAR YEREMKTYIP PKGETKKKFK DPNAPKRPPS AFFLFCSEYR PKIKGEHPGL SIGDVAKKLG EMWNNTAADD KQPYEKKAAK LKEKYEKDIA AYRAKGKPDA AKKGVVKAEK SKKKKEEEDD EEDEEDEEEE EEEEDEDEEE DDDDE"]
分子量:HMGB1由215個氨基酸殘基組成,計算出的分子量約為24.8 kDa。由于其所含不尋常的帶正電荷氨基酸的數量,它在SDS-PAGE凝膠中的遷移位置大約為30 kD。
結構:HMGB1由兩個相當剛性的L形DNA結合域組成,每個域被稱為‘HMG盒’,以及一個以30個連續帶負電荷的氨基酸結尾的無序尾部。
物種特異性:HMGB1的序列和結構在進化過程中被嚴格保守,所有哺乳動物的HMGB1蛋白質幾乎相同(Sessa L, Bianchi ME. 多細胞動物中高遷移率族箱(HMGB)染色質蛋白的進化。Gene 2007, 387:133-40)。
純度:純化的蛋白質>95%均一(電泳和質譜分析)。它不含核酸,也不含有IL-1beta。
內毒素水平:純化的蛋白質無LPS(Cambrex鱟細胞活性測定QCL-1000,<0.1 EU/µg蛋白質)。
儲存:2-8°C。一旦蛋白質重懸,它們可以冷凍儲存(-20°C)。
本產品僅供研究使用,不能用于人體。
HMGBiotech-HMGB1亞型試劑盒部分出版參考:
An 8-Hydroxy-Quinoline Derivative Protects Against Lipopolysaccharide-Induced Lethality in Endotoxemia by Inhibiting HMGB1-Mediated Caspase-11 Signaling
Lipopolysaccharide-Activated Canine Platelets Upregulate High Mobility Group Box-1 via Toll-Like Receptor 4
A RAGE-antagonist peptide potentiates polymeric micelle-mediated intracellular delivery of plasmid DNA for acute lung injury gene therapy
The Time-Course of Antioxidant Irisin Activity: Role of the Nrf2/HO-1/HMGB1 Axis
Lipopolysaccharide-regulated secretion of soluble and vesicle-based proteins from a panel of colorectal cancer cell lines
High-mobility group box protein-1 induces acute pancreatitis through activation of neutrophil extracellular trap and subsequent production of IL-1β
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