SYBR Green qPCR 預混液
MCE 國際站：SYBR Green qPCR Master Mix (High ROX)
品牌：MedChemExpress (MCE)
存儲條件： -20℃ 2 年避光保存，避免反復凍融。
簡介：SYBR Green qPCR Master Mix (High ROX) 是一種 2× 濃度的即用型預混液，含有 qPCR 的所有組分， 只需加入樣品 DNA，引物和水即可快速高效完成 qPCR 反應。
概述：本產品是采用 SYBR Green I 嵌合熒光法進行 Real Time PCR 的一種 2× 濃度的 Premix Type 試劑。制品中含有 Real Time PCR 反應的合適濃度 SYBR Green I，Hot Start 法用 DNA 聚合酶，適合 Real Time PCR 的 Buffer 組合，可以有效抑制非特異性的 PCR 擴增，大大提高 PCR 的擴增效率，適合進行高靈敏度的RealTime PCR 擴增反應。本產品適用于快速 Real Time PCR 擴增反應，可以在寬廣的定量區間內得到良好的標準曲線，對靶基因進行準確定量檢測，重復性好，可信度高。本產品預先混有 Taq DNA Polymerase、PCR Buffer、dNTPs、SYBR Green I 熒光染料、穩定劑和鎂離子等通用組分，只需加入模板、引物、雙蒸餾水便可進行 Real Time PCR 反應，操作簡單方便。本品內含 High ROX Reference Dye，適用于需要校正孔間熒光信號誤差的儀器。適用機型：ABI GeneAmp 5700; ABI PRISM 7000, 7700; ABI 7300, 7900HT (Fast); ABI StepOne (Plus)
描述：
Super Hot-Start SYBR Green qPCR Master Mix 是一種即用型 qPCR 混合物。它含有新型 Taq DNA 聚合酶、熱啟動試劑、優化的緩沖液、SYBR Green I、dNTP、PCR 增強劑和 PCR 穩定劑。qPCR Master Mix 以 2 倍濃度提供，可通過添加模板、引物和 ddH2O 以 1 倍濃度使用。
MCE qPCR Master Mix（高 ROX）可直接用于穩定、低模板定量 PCR，具有高靈敏度、特異性和可靠性。隨附高 ROX 參考染料，用于需要高水平參考染料來糾正不同孔之間熒光信號誤差的儀器。
MCE qPCR Master Mix（高 ROX）適用于以下實時 PCR 儀器：
ABI GeneAmp 5700； ABI PRISM 7000、7700；ABI 7300、7900HT（快速）；ABI StepOne（增強型）
1. 即用型。
2. 優化的緩沖液可提高特異性并減少引物二聚體的形成。
3. 高靈敏度、特異性和可靠性。
4. 含有高 ROX 參考染料。
操作說明：1) 配置反應體系：建議的模板量為 10-100 ng (基因組 DNA)或 1-10 ng (cDNA 模板)。推薦使用 MCE RT Master Mix for qPCR (gDNA digester plus) (HY-K0511)合成 DNA 模版，以有效去除 RNA 樣品中殘留的基因組。配制 PCR 反應液 (反應液配制請在冰上進行)。注：(1) 通常引物終濃度為 0.2 μM 可以得到較好結果。反應性能較差時，可以在 0.1～1.0 μM 范圍內調整引物濃度。(2) 在 20 μL 反應體系中，DNA 模板的添加量通常在 100 ng 以下。因不同種類的 DNA 模板中含有的靶基因的拷貝數不同，必要時可進行梯度稀釋，確定合適的 DNA 模板添加量。(3) 按照各儀器推薦體系進行反應液配制。2) 進行 Real Time PCR 反應。建議采用下列圖表顯示的兩步法 PCR 反應程序，如果該程序得不到良好的實驗結果時，再進行 PCR 條件的優化。由于使用 Tm 值較低的引物等原因，兩步法PCR 反應擴增性能較差時，可以嘗試進行三步法 PCR 擴增反應。注：(1) 預變性時間：根據不同模版和引物的具體情況可適當縮短至 2 min；(2) 退火溫度和時間：根據引物和目的基因的長度進行調整；(3) 熔解曲線：通常情況下可以使用儀器默認程序。
注意事項：1. 使用前，請上下輕輕顛倒混勻，避免產生氣泡，防止因混合不均勻造成反應效果不佳。(1) 請勿渦旋振蕩混勻。(2) SYBR Green Master Mix (2×) (High ROX) 在 -80℃ 存放可能會產生白色或淡黃的沉淀，用手握緩慢溶解，于室溫短時間避光放置，輕柔上下顛倒混勻直至沉淀全部消失。(3) 沉淀會導致溶液成分不均勻，使用前務必充分混勻試劑。2. 配制反應液時，試劑請于冰上放置。3. 本制品中含有熒光染料 SYBR Green I，配制 PCR 反應液時避免強光照射。4. 反應液的配制、分裝請一定使用新(無污染)槍頭、Microtube 等，避免污染。5. 本產品僅限于專業人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品。6. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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