SYBR Green qPCR 預混液
MCE 國際站：SYBR Green qPCR Master Mix (Low ROX)
品牌：MedChemExpress (MCE)
存儲條件： -20℃ 2 年避光保存，避免反復凍融。
簡介：SYBR Green qPCR Master Mix (Low ROX) 是一種 2× 濃度的即用型預混液，含有 qPCR 的所有組分， 只需加入樣品 DNA，引物和水即可快速高效完成 qPCR 反應。
概述：本產品是采用 SYBR Green I 嵌合熒光法進行 Real Time PCR 的一種 2× 濃度的 Premix Type 試劑。制品中含有 Real Time PCR 反應的合適濃度 SYBR Green I，Hot Start 法用 DNA 聚合酶，適合 Real Time PCR 的 Buffer 組合，可以有效抑制非特異性的 PCR 擴增，大大提高 PCR 的擴增效率，適合進行高靈敏度的 Real Time PCR 擴增反應。本產品適用于快速 Real Time PCR 擴增反應，可以在寬廣的定量區間內得到良好的標準曲線，對靶基因進行準確的定量檢測，重復性好，可信度高。本產品預先混有 Taq DNA Polymerase、PCR Buffer、dNTPs、SYBR Green I 熒光染料、穩定劑和鎂離子等通用組分，只需加入模板、引物、雙蒸餾水便可進行 Real Time PCR 反應，操作簡單方便。本品內含 Low ROX Reference Dye，適用于需要校正孔間熒光信號誤差的儀器。適用機型：Applied Biosystems: 7500, 7500 Fast, ViiA 7, QuantStudio Dx, QuantStudio 3 and 5, QuantStudio 6, 7, 12k Flex;Stratagene: MX3000P, MX3005P, MX4000
描述：
Super Hot-Start SYBR Green qPCR Master Mix 是一種即用型 qPCR 混合物。它包含新型 Taq DNA 聚合酶、獨熱啟動試劑、優化的緩沖液、SYBR Green I、dNTP、PCR 增強劑和 PCR 穩定劑。qPCR Master Mix 以 2 倍濃度提供，可通過添加模板、引物和 ddH2O 以 1 倍濃度使用。
MCE qPCR Master Mix（低 ROX）可直接用于穩健且低模板的定量 PCR，具有高靈敏度、特異性和可靠性。低 ROX 參考染料可用于需要低水平參考染料的儀器，以糾正不同孔之間熒光信號的錯誤。
MCE qPCR Master Mix（低 ROX）用于實時 PCR 儀器，如下所示：
ABI：7500（快速）、ViiA 7、QuantStudio 6 和 7 Flex 系統；Stratagene：Mx3000P、Mx3005P 和 Mx4000；Qiagen/Corbett Rotor-Gene：3000；Bio-Rad/MJ：Chromo4、Opticon 2 和 Opticon
1. 即用型。
2. 優化的緩沖液增強了特異性并減少了引物二聚體的形成。
3. 高靈敏度、特異性和可靠性。
4.包含低 ROX 參考染料。
操作說明：1) 配置反應體系：建議的模板量為 10-100 ng (基因組 DNA)或 1-10 ng (cDNA 模板)。推薦使用 MCE RT Master Mix for qPCR (gDNA digester plus) (HY-K0511) 合成 DNA 模版，以有效去除 RNA 樣品中殘留的基因組。配制 PCR 反應液 (反應液配制請在冰上進行)注：(1) 通常引物終濃度為 0.2 μM 可以得到較好結果。反應性能較差時，可以在 0.1～1.0 μM 范圍內調整引物濃度。(2) 在 20 μL 反應體系中，DNA 模板的添加量通常在 100 ng 以下。因不同種類的 DNA 模板中含有的靶基因的拷貝數不同，必要時可進行梯度稀釋，確定合適的 DNA 模板添加量(3) 按照各儀器推薦體系進行反應液配制2) 進行 Real Time PCR 反應。建議采用下列圖表顯示的兩步法 PCR 反應程序，如果該程序得不到良好的實驗結果時，再進行PCR條件的優化。由于使用 Tm 值較低的引物等原因，兩步法PCR 反應擴增性能較差時，可以嘗試進行三步法 PCR 擴增反應。注：(1) 預變性時間：根據不同模版和引物的具體情況可適當縮短至 2 min；(2) 退火溫度和時間：根據引物和目的基因的長度進行調整；(3) 熔解曲線：通常情況下可以使用儀器默認程序
注意事項：1. 使用前，請上下輕輕顛倒混勻，避免產生氣泡，防止因混合不均勻造成反應效果不佳。(1) 請勿渦旋振蕩混勻。(2) SYBR Green Master Mix (2×) (Low ROX) 在 -80℃ 存放可能會產生白色或淡黃的沉淀，用手握緩慢溶解，于室溫短時間避光放置，輕柔上下顛倒混勻直至沉淀全部消失。(3) 沉淀會導致溶液成分不均勻，使用前務必充分混勻試劑。2. 配制反應液時，試劑請于冰上放置。3. 本制品中含有熒光染料 SYBR Green I，配制 PCR 反應液時避免強光照射。4. 反應液的配制、分裝請一定使用新(無污染)槍頭、Microtube 等，避免污染。5. 本產品僅限于專業人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品。6. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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