植物銨態(tài)氮試劑盒說(shuō)明書(shū)

微量法 100T/96S

正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定

測(cè)定意義：

氮素是構(gòu)成生物體的一種必需元素，自然界中的氮素循環(huán)包括許多轉(zhuǎn)化作用。空氣中的氮?dú)獗还痰⑸锛爸参锱c微生物的共生體固定成氨態(tài)氮，經(jīng)過(guò)硝化微生物的作用轉(zhuǎn)化成硝態(tài)氮，后者被植物或微生物同化成有機(jī)氮化物，植物組織氨氮含量可反映植物受脅迫的程度。

測(cè)定原理：

α-氨基酸與水合茚三酮溶液一起加熱，經(jīng)氧化脫氨變成相應(yīng)的α-酮酸，酮酸進(jìn)一步脫羧變成醛，水合茚三酮?jiǎng)t被還原，在弱酸環(huán)境中，還原型茚三酮，氨和另一分子水合茚三酮反應(yīng)， 縮合生成藍(lán)紫色物質(zhì)，在 580nm 處有特征吸收峰。

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組成：

試劑二：粉劑×1 瓶，4℃避光保存。臨用前加 1.5ml 蒸餾水充分溶解。

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)的參數(shù)為準(zhǔn)

自備儀器和用品：

天平、研缽、常溫離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96 孔板、恒溫水浴鍋。

樣本處理：

按照質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為 1：5~10 的比例（建議稱(chēng)取約 0.1g，加入 1ml 提取液）加入提取液，室溫勻漿后于 25℃，12000g 離心 10min，取上清待測(cè)。

測(cè)定操作表：

注意：空白管只需測(cè)定一次。

計(jì)算公式：

a. 用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下標(biāo)準(zhǔn)曲線：y=0.1535x-0.0279，R²=0.9993

NH4+—N 含量（μg/g 鮮重）=（△A+0.0279）÷ 0.1535×V 反總÷（W×V 樣÷V 樣總）

= 32.9×（△A+0.0279）÷W

V 反總：反應(yīng)總體積，0.315ml；V 樣：反應(yīng)體系中加入樣本體積，0.06ml；V 樣總：加入提取液體積，1ml，

W：樣本質(zhì)量，g

b. 用 96 孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下

標(biāo)準(zhǔn)曲線：y=0.0768x-0.0279，R²=0.9993

NH4+—N 含量（μg/g 鮮重）=（△A+0.0279）÷ 0.0768×V 反總÷（W×V 樣÷V 樣總）

= 65.8×（△A+0.0279）÷W

V 反總：反應(yīng)總體積，0.315ml；V 樣：反應(yīng)體系中加入樣本體積，0.06ml；V 樣總：加入提取液體積，1ml，

W：樣本質(zhì)量，g

注意事項(xiàng)：

1. 提取好的待測(cè)液盡快測(cè)定，低溫保存不得超過(guò) 24 小時(shí)。

2. 沸水浴時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，否則會(huì)對(duì)測(cè)定結(jié)果有影響。

3. 顯色后 20min 內(nèi)完成測(cè)定。

4.zui低檢出限為 18μg/g。

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