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供貨周期 | 現貨 | 規格 | 50T/48S |
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貨號 | BI6012 | 應用領域 | 環保,化工,生物產業,農林牧漁,制藥/生物制藥 |
主要用途 | 山li醇脫氫酶試劑盒 |
山li醇脫氫酶(sorbitol dehydrogenase,SH)試劑盒說明書
分光光度法 50 管/48 樣
SH(EC 1.1.1.14)催化山li醇脫氫生成果糖,是調控生物體內山li醇含量的關健酶之一。
SH 催化山li醇脫氫生成果糖,同時還原 NAD+生成NADH,測定 340nm 吸光度增加速率可以計算 SH活性。
產品名稱 | BI6012-50T/48S | Storage |
提取液:液體 | 60ml | 4℃ |
試劑一:液體 | 20ml | 4℃ |
試劑二:粉劑 | 1 瓶 | 4℃ |
試劑三:粉劑 | 1 瓶 | -20℃ |
說明書 | 一份 |
試劑二:粉劑×1 瓶,4℃保存;臨用前每瓶加入 15ml 蒸餾水,用不完的試劑仍 4℃保存。 試劑三:粉劑×1 瓶,-20℃保存;臨用前每瓶加入15ml 蒸餾水,用不完的試劑仍-20℃保存。
具體產品的參數以收到產品說明書的參數為準
紫外分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、1ml 石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
1、細菌或培養細胞:先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細菌或細胞數量(104 個):提取液體積(ml)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細菌或細胞加入 1ml 提取液),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次);8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
2、組織:按照組織質量(g):提取液體積(ml)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1ml 提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
3、血清(漿)樣品:直接檢測。
1、分光光度計預熱 30min 以上,調節波長至 340nm,蒸餾水調零。
2、樣本測定
試劑名稱(μl) | 測定管 |
試劑一 | 400 |
試劑二 | 300 |
試劑三 | 300 |
混勻,37℃(哺乳動物)或 25℃(其它物種)準確水浴 5min
將上述試劑按順序加入 1 ml 玻璃比色皿中,加樣本的同時開始計時,記錄 20 秒時的初始吸光度A1 和 2分 20 秒時的吸光度A2,計算ΔA=A2-A1。
1、血清(漿)SH 活力的計算
單位的定義:每毫升血清(漿)每分鐘生成 1 nmol NADH 定義為一個酶活力單位。
SH(nmol/min/ml)= [ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷V 樣÷T=1688×ΔA 2、組織、細菌或細胞中 SH 活力的計算:
(1) 按樣本蛋白濃度計算:
單位的定義:每mg 組織蛋白每分鐘生成 1 nmol NADH 定義為一個酶活力單位。
SH(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(V 樣×Cpr) ÷T=1688×ΔA÷Cpr
(2) 按樣本鮮重計算:
單位的定義:每g 組織每分鐘消耗 1 nmol NADH 定義為一個酶活力單位。
SH(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(W× V 樣÷V 樣總) ÷T=1688×ΔA÷W
(3) 按細菌或細胞密度計算:
單位的定義:每 1 萬個細菌或細胞每分鐘生成 1 nmol NADH 定義為一個酶活力單位。
SH(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(500×V 樣÷V 樣總) ÷T=3.376×ΔA
V 反總:反應體系總體積,1.05×10-3 L;ε:NADH 摩爾消光系數,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑, 1cm;V 樣:加入樣本體積,0.05 ml;V 樣總:加入提取液體積,1 ml;T:反應時間,2 min;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/ml;W:樣本質量,g;500:細菌或細胞總數,500 萬。
山li醇脫氫酶試劑盒 糖代謝系列-常備現貨
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