土壤漆酶（Soil Laccase，SL）試劑盒說明書

分光光度法 50 管/24 樣

正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定測定意義：

漆酶（Laccase）是一種含銅的多酚氧化酶，屬于銅藍氧化酶家族，廣泛分布于真菌和高等植物中，具有較強的氧化還原能力，在紙漿生物漂白，環(huán)境污染物降解和木質(zhì)纖維素降解以及生物檢測方面有非常廣泛的應用。

測定原理：

漆酶分解底物ABTS 產(chǎn)生ABTS 自由基，在 420nm 處的吸光系數(shù)遠大于底物ABTS，測定 ABTS 自由基的增加速率，可計算得漆酶活性。

土壤漆酶試劑盒  常備現(xiàn)貨

試劑組成和配制：

工作液：粉劑×2 瓶，4℃避光保存，臨用前每瓶加 25ml 試劑一溶解。

自備儀器和用品：

天平、低溫離心機、可見分光光度計、1 ml 玻璃比色皿、震蕩儀。

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準

樣品處理：

新鮮土樣風干，過 30-50 目篩。

測定步驟：

1、分光光度計預熱 30min，調(diào)節(jié)波長到 420nm，蒸餾水調(diào)零。

37℃震蕩反應 10min，冰浴 5min，10000g，4℃離心 10min，取出800μl 反應液立即于 420nm 處測定吸光值，分別記為A1，A2。△A=A2-A1。

酶活性計算公式：

酶活性定義：每克土壤每分鐘氧化 1nmol 底物ABTS 所需的酶量為一個酶活力單位（U）。

DA

SL 活性（nmol/min/g 土樣）=

e′ d ×V 反總÷W÷T= 2.78×△A÷W

ε：ABTS 毫摩爾消光系數(shù)：36L/mmol/cm；d：比色皿光徑，1cm；V 反總：反應總體積，1ml； W：樣本質(zhì)量，g；T：反應時間，10min

注意事項:

1、工作液需臨用前配制，并且盡快使用，4℃保存一周，若變色則不能使用。

2、測定之前進行預實驗，若吸光值較高，請將樣品用提取液進行適當?shù)南♂屧贉y定，并在計算公式中乘以稀釋倍數(shù)。

3、反應完立即記錄數(shù)據(jù)，以免造成逆向反應影響實驗結(jié)果。

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